GB 23200.15-2016 食品安全国家标准
食用菌中503种农药及相关化学品残留量的测定
气相色谱-质谱法
前 言
本标准代替GB/T 23216-2008 《食用菌中503种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》。
本标准与GB/T 23216-2008相比，主要变化如下：
—标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；
—标准范围中增加“其它食用菌可参照执行”。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：
—GB/T 23216-2008。
1 范围
本标准规定了滑子菇、金针菇、黑木耳、香菇中503种农药及相关化学品（参见附录A）残留量气相色谱-质谱测定方法。
本标准适用于滑子菇、金针菇、黑木耳、香菇中503种农药及相关化学品的定性鉴别，478种农药及相关化学品的定量测定，其它食用菌可参照执行。
2 规范性引用文件
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2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留xian量
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
试样用乙腈匀浆提取，盐析离心，固相萃取柱净化，用乙腈+甲苯（3+1，体积比）洗脱农药及相关化学品，用气相色谱-质谱仪测定，内标法定量。
4 试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。
4.1 试剂
4.1.1乙腈（CH3CN，75-05-8）：色谱纯。
4.1.2甲苯（C7H8，108-88-3）：色谱纯。
4.1.3正己烷（C6H14，110-54-3）：色谱纯。
4.1.4丙酮（CH3COCH3，67-64-1）：色谱纯。
4.1.5环己烷（C6H12，110-82-7）：色谱纯。
4.1.6异辛烷（C8H18，540-84-1）：色谱纯。
4.1.7乙酸乙酯（CH3COOCH2CH3，141-78-6）：色谱纯。
4.1.8 氯化钠（NaCl，7647-14-5）：优级纯。
4.1.9无水硫酸钠（Na2SO4，7757-82-6）：分析纯。650 ℃灼烧4 h，贮于干燥器中，冷却后备用。
4.2 溶液配制
乙腈-甲苯溶液（3+1）：取300 mL乙腈，加入100 mL甲苯，摇匀备用。
4.3 标准品
农药及相关化学品标准物质：纯度≥95%，参见附录A。
4.4标准溶液配制
4.4.1标准储备溶液
准确称取5 mg~10 mg（精确至0.1mg）农药及相关化学品各标准物分别放入10 mL容量瓶中，根
据标准物的溶解性和测定的需要选甲苯、甲苯+丙酮混合液、二氯甲烷等溶剂溶解并定容至刻度（溶剂选择参见附录A）。标准储备溶液避光4℃保存，保存期为一年。
4.4.2 内标溶液
准确称取3.5 mg环氧七氯于100 mL容量瓶中，用甲苯定容至刻度。
4.4.3混合标准溶液（混合标准溶液A、B、C、D、E和F）
按照农药及相关化学品的性质和保留时间，将503种农药及相关化学品分成A、B、C、D、E、F六个组，并根据每种农药及相关化学品在仪器上的响应灵敏度，确定其在混合标准溶液中的浓度。本标准对503种农药及相关化学品的分组及其混合标准溶液浓度参见附录A。
依据每种农药及相关化学品的分组号、混合标准溶液浓度及其标准储备液的浓度，移取一定量的单个农药及相关化学品标准储备溶液于100 mL容量瓶中，用甲苯定容至刻度。混合标准溶液避光4℃保存，保存期为一个月。
4.4.4基质混合标准工作溶液
A、B、C、D、E、F组农药及相关化学品基质混合标准工作溶液是将40 μL内标溶液和一定体积的A、B、C、D、E、F组混合标准溶液分别加到1.0 mL的样品空白基质提取液中，混匀，配成基质混合标准工作溶液A、B、C、D、E 和F。基质混合标准工作溶液应现用现配。
4.5 材料
Sep-Pak CarbonNH2 固相萃取柱：6mL，1g或相当者。
5 仪器和设备
5.1气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源（EI）。
5.2分析天平：感量0.1 mg和0.01 g。
5.3离心管：80 mL。
5.4高速组织捣碎机: zui低转速不低于12 000 r/min。
5.5离心机：zui低转速不低于为4 200 r/min。
5.6鸡心瓶：100 mL
5.7移液器：1 mL和10 mL。
5.8旋转蒸发器。
5.9样品瓶：2 mL，带聚四氟乙烯旋盖。
6 试样制备
食用菌样品取样部位按GB 2763附录A执行，将样品切碎混匀均一化制成匀浆，制备好的试样均分成两份，装入洁净的盛样容器内，密封并标明标记。将试样于-18℃冷冻保存。
7 分析步骤
7.1 提取
称取20 g试样（精确至0.01 g）于80 mL离心管中，加入40 mL乙腈，1 5000 r/ min匀浆提取1 min，加入5 g氯化钠，再匀浆提取1 min，在4 200 r/ min条件下离心5 min，取上清液20 mL（相当于10 g试样量），40 ℃水浴中旋转浓缩至1 mL左右，待净化。
7.2 净化
在Sep-Pak CarbonNH2固相萃取柱中加入约2 cm高无水硫酸钠，置于下接废液瓶的固相萃取装置上。加样前先用4 mL乙腈-甲苯溶液预洗柱，当液面到达无水硫酸钠的顶部时，迅速将样品浓缩液转移至净化柱上中，并更换鸡心瓶接收。用2 mL乙腈-甲苯溶液将残留样液转移于萃取柱中，此操作重复3次。在固相萃取柱顶端连接50 mL贮液器，用25 mL乙腈-甲苯溶液洗脱农药及相关化学品，合并于100mL鸡心瓶中，40℃水浴旋转浓缩至0.5 mL左右。加入5 mL正己烷进行溶剂交换，重复两次。定容1 mL左右，加入40 µL内标溶液，混匀，供气相色谱-质谱仪测定。
同时取不含农药及相关化学品的食用菌样品，按上述步骤制备样品空白提取液，用于配制基质混合标准工作溶液。
7.3 测定
7.3.1气相色谱-质谱参考条件
a) 色谱柱：DB-1701（14%氰丙基-苯基）－甲基聚硅氧烷，30 m×0.25 mm×0.25 μm，石英毛细管柱或相当者；
b) 色谱柱温度：40 ℃保持1 min，然后以30 ℃/min程序升温至130 ℃，再以5 ℃/min升温至250 ℃，再以10 ℃/min升温至300 ℃，保持5 min；
c) 载气：氦气，纯度≥99.999%，流速，1.2 mL/min；
d) 进样口温度：290 ℃；
e) 进样量：1 μL；
f) 进样方式：无分流进样，1.5 min后打开阀；
g) 电子轰击源：70 eV；
h) 离子源温度：230 ℃；
i) GC-MS接口温度：280 ℃；
j) 溶剂延迟：A组8.30min，B组7.80min，C组7.30min，D组5.50min，E组6.10min，F组5.50min；
k) 选择离子监测：每种化合物分别选择一个定量离子，2个～3个定性离子。每组所有需要检测的离子按照出峰顺序，分时段分别检测。每种化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与定性离子的丰度比值，参见附录B。每组检测离子的开始时间和驻留时间参见附录C。
7.3.2 定性测定
进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比相一致（相对丰度＞50％，允许±10％偏差；相对丰度＞20％至50％，允许±15％偏差；相对丰度＞10％至20％，允许±20％偏差；相对丰度≤10％，允许±50％偏差），则可判断样品中存在这种农药或相关化学品。如果不能确证，应重新进样，以扫描方式（有足够灵敏度）或采用增加其他确证离子的方式或用其他灵敏度更高的分析仪器来确证。
7.3.3 定量测定
本标准采用内标法单离子定量测定。内标物为环氧七氯。为减少基质的影响，定量用标准应采用基质样品液配制混合标准工作溶液。标准溶液的浓度应与待测化合物的浓度相近。本标准的A、B、C、D、E、F六组标准物质在滑子菇基质中选择离子监测GC-MS图参见附录D。
7.4 平行试验
按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。
7.5 空白试验
除不称取试样外，均按上述步骤进行。
8 结果计算和表述
气相色谱-质谱测定结果可由色谱工作站按内标法自动计算，也可按式(1)计算：
式中：
Xi——试样中被测物残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
cs——基质标准工作溶液中被测物的浓度，单位为微克每毫升（µg/Ml）。
A——试样溶液中被测物的色谱峰面积；
As——基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积；
ci——试样溶液中内标物的浓度，单位为微克每毫升（µg/mL）；
csi——基质标准工作溶液中内标物的浓度，单位为微克每毫升（µg/mL）；
Asi——基质标准工作溶液中内标物的色谱峰面积；
Ai——试样溶液中内标物的色谱峰面积；
V——样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；
m——试样溶液所代表试样的质量，单位为克（g）。
计算结果应扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。
9 精密度
9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录E的要求。
9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录F的要求。
10 定量限和回收率
10.1 定量限
本方法的定量限见附录A。
10.2 回收率
当添加水平为LOQ、4×LOQ时,添加回收率参见附录G。
