蜂蜜、果汁和果酒中497种农药及相关化学品残留量的测定

GB 23200.7-2016 食品安全国家标准

蜂蜜、果汁和果酒中497种农药及相关化学品残留量的测定

气相色谱-质谱法

前 言

本标准代替GB/T 19426-2006《蜂蜜、果汁和果酒中497种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法》。

本标准与GB/T 19426-2006相比，主要变化如下：

—标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；

—标准范围中增加“其它食品可参照执行”。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为：

—GB/T 19426-2006。

1 范围

本标准规定了蜂蜜、果汁和果酒中497种农药及相关化学品（参见附录A）残留量气相色谱-质谱测定方法。

本标准适用于蜂蜜、果汁和果酒中497种农药及相关化学品残留量的测定，其它食品可参照执行。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不ke少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其新版本（包括所有的修改dan）适用于本文件。

GB 2763标准 食品中农药最大残留xian量

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 原理

试样用二氯甲烷提取，经串联Envi-Carb^1）和Sep-Pak-NH2^2）柱净化，用乙腈-甲苯溶液（3+1）洗脱农药及相关化学品，用气相色谱-质谱仪检测。

4 试剂和材料

除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。

4.1 试剂

4.1.1乙腈（CH3CN，75-05-8）：色谱纯。

4.1.2丙酮(CH3COCH3，67-64-1)：色谱纯。

4.1.3二氯甲烷（CH2Cl2，75-09-2）：色谱纯。

4.1.4无水硫酸钠（Na2SO4，7757-82-6）：分析纯。用前在650℃灼烧4h，贮于干燥器中，冷却后备用。

4.1.5甲苯（C7H8，108-88-3）：优级纯。

4.1.6正己烷（C6H14，110-54-3）：色谱纯。

4.2标准品

农药及相关化学品标准物质：纯度≥95%，参见附录A。

4.3标准溶液配制

4.3.1标准储备溶液

分别称取5mg~10mg（精确至0.1mg）农药及相关化学品各标准物分别于50mL烧杯中，根据标准物的溶解性选甲苯、甲苯-丙酮混合液、二氯甲烷等溶剂溶解，转移到10mL容量瓶中，分别用相应的试剂或溶液定容至刻度（溶剂选择参见附录A），标准溶液避光4℃保存，保存期为一个月。

4.3.2混合标准溶液（混合标准溶液A、B、C、D和E）

按照农药及相关化学品的保留时间，将497种农药及相关化学品分成A、B、C、D、E五个组，并根据每种农药及相关化学品在仪器上的响应灵敏度，确定其在混合标准溶液中的质量浓度。本标准对497种农药及相关化学品的分组及其混合标准溶液质量浓度参见附录A。

依据每种农药及相关化学品的分组号、混合标准溶液质量浓度及其标准储备液的质量浓度，移取一定量的单个农药及相关化学品标准储备溶液于100mL容量瓶中，用甲苯定容至刻度。混合标准溶液避光4℃保存，保存期为一个月。

4.3.3内标溶液

准确称取3.5mg环氧七氯于50mL烧杯中，用甲苯溶解后转移入100mL容量瓶中，用甲苯定容至刻度。

4.3.4基质混合标准工作溶液

将40μL内标溶液（4.3.3）和一定体积的混合标准溶液分别加到1.0mL的样品空白基质提取液中，混匀，配成基质混合标准工作溶液A、B、C、D和E。基质混合标准工作溶液应现用现配。

4.4 材料

4.4.1 Envi-Carb柱：6mL，0.5g或相当者。

4.4.2Sep-Pak-NH2柱：3 mL，0.5g或相当者。

5  仪器和设备

5.1气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源（EI）。

5.2 分析天平：感量0.01 g和0.0001 g。

5.3 鸡心瓶：200mL。

5.4 移液器：1 mL。

5.5 具塞锥形瓶：250 mL。

5.6 分液漏斗：250mL。

5.7 筒形漏斗。

6 试样制备

对无结晶的蜂蜜样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60℃的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温。分出0.5kg作为试样，置于样品瓶中，密封，并标明标记。

果汁、果酒样品，将取得的全部原始样品倒入洁净的搪瓷混样桶内，充分搅拌混匀，再将混匀样品分装出两份（每份500mL），密封，作为试样，标明标记。

7 分析步骤

7.1 提取

称取15g试样（精确至0.01g）于250mL具塞锥形瓶中，加入30mL水，于40℃振荡水浴上，振荡溶解15min。加入10mL丙酮，然后将瓶中内容物移入250mL分液漏斗中，用40mL二氯甲烷分数次洗涤锥形瓶，并将洗液倒入分液漏斗中，振摇八次，小心排气，静置分层，将下层有机相通过装有无水硫

酸钠的筒形漏斗，收集于200mL鸡心瓶中。再依次加入5mL丙酮和40mL二氯甲烷于分液漏斗中，振摇1min，静置、分层后收集。如此重复提取两次，合并提取液，将提取液于40℃水浴旋转蒸发至约1mL，待净化。

7.2净化

在Envi-Carb柱中加入约2cm高无水硫酸钠，将该柱连接在Sep-Pak-NH2柱顶部，并将串联柱放入下接鸡心瓶的固定架上。加样前先用4mL乙腈-甲苯溶液预洗柱，当液面到达硫酸钠的顶部时，迅速将样品提取液转移至净化柱上，再用3×2mL乙腈-甲苯溶液洗涤样液瓶，并将洗液移入柱中。在串联柱上加上50mL贮液器，用25mL乙腈-甲苯溶液洗脱农药及相关化学品，收集所有流出物于鸡心瓶中，并在40℃水浴中旋转浓缩至约0.5mL。用2×5mL正己烷进行溶剂交换两次，最后使样液体积约为1mL，加入40μL内标溶液，混匀，用于气相色谱-质谱测定。

7.3测定

7.3.1气相色谱-质谱参考条件

a)  色谱柱：DB-1701（30m×0.25mm×0.25μm）石英毛细管柱或相当者；

b)  色谱柱温度：40℃保持1min，然后以30℃/min程序升温至130℃，再以5℃/min升温至250℃，再以10℃/min升温至300℃，保持5 min；

c)  载气：氦气，纯度≥99.999%，流速：1.2mL/min；

d)  进样口温度：290℃；

e)  进样量:1μL；

f)  进样方式：无分流进样，1.5min后开阀；

g)  电子轰击源：70 eV；

h)  离子源温度：230℃；

i)  GC-MS接口温度：280℃；

j)  选择离子监测：497种农药及相关化学品根据保留时间分为A、B、C、D、E五组，每种化合物分别选择一个定量离子，2个~3个定性离子。每组所有需要检测的离子按照出峰顺序，分时段分别检测。每种化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与定性离子的丰度比值，参见附录B。每组检测离子的开始时间和驻留时间参见附录C。

7.3.2定性测定

样品提取液按照气相色谱-质谱测定条件分别测定A、B、C、D、E五组。进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比相一致（相对丰度＞50％，允许±10％偏差；相对丰度＞20％～50％，允许±15％偏差；相对丰度＞10％～20％，允许±20％偏差；相对丰度≤10％，允许±50％偏差），则可判断样品中存在这种农药或相关化学品。如果不能确证，应重新进样，以扫描方式（有足够灵敏度）或采用增加其他确证离子的方式或用其他灵敏度更高的分析仪器来确证。

7.3.3定量测定

本方法采用内标法单离子定量测定，内标物为环氧七氯。定量用标准应采用基质混合标准工作溶液。标准溶液的质量浓度应与待测化合物的质量浓度相近。本方法的A、B、C、D、E五组标准物质在蜂蜜基质中选择离子监测GC-MS图参见附录D。

7.4平行试验

按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。

7.5空白试验

除不称取试样外，均按上述步骤进行。

8  结果计算和表述

气相色谱-质谱测定结果可由计算机按内标法自动计算，也可按式(1)计算：

计算结果应扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。

9 精密度

9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录E的要求。

9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录F的要求。

10  定量限和回收率

10.1 定量限

本方法的定量限见附录A。

10.2 回收率

当添加水平为 LOQ、 2×LOQ、 5×LOQ时,添加回收率参见附录G。