GB 23200.33-2016 食品安全国家标准
食品中解草嗪、莎稗磷、二丙烯草胺等110 种农药残留量的测定
气相色谱-质谱法
前 言
本标准代替SN/T 2149-2008 《进出口食品中解草嗪、莎稗磷、二丙烯草胺等110种农药残留量的检测方法 气相色谱-质谱法》。
本标准与SN/T 2149-2008相比，主要变化如下：
—标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；
—标准名称中“进出口食品"改为“食品"；
—标准范围中增加“其它食品可参照执行"。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：
—SN/T 2149-2008。
1 范围
本标准规定了食品中110种农药（见附录A）残留量检测的气相色谱-质谱检测方法。
本标准适用于大米、糙米、大麦、小麦、玉米中110种农药残留量的测定，其它食品可参照执行。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不ke少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改dan）适用于本文件。
GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留xian量
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
试样加水浸泡后用丙酮振荡提取，然后依次通过液-液分配、凝胶渗透色谱和固相萃取对提取液进行净化，用气相色谱-质谱仪检测，标准曲线外标法定量。
4 试剂和材料
除另有说明，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。
4.1 试剂
4.1.1 丙酮（CH3COCH3）：色谱纯。
4.1.2 二氯甲烷(CH2Cl2)。
4.1.3 环己烷(C6H12)。
4.1.4 乙酸乙酯(CH3COOC2H5)。
4.1.5 乙腈(C2H3N)。
4.1.6 甲苯(C7H8)。
4.1.7 氯化钠(NaCl)。
4.1.8 无水硫酸钠(Na2SO4)：使用前在650℃灼烧4小时,贮于干燥器中，冷却后备用。
4.2 溶液配制
4.2.1 氯化钠溶液（15%，w/v）：称取15 g 氯化钠，溶于100 mL 水中，摇匀备用。
4.2.2 环己烷-乙酸乙酯（1＋1，V/V）：取100 mL环己烷，加入100 mL乙酸乙酯，摇匀备用。
4.2.3 乙腈-甲苯(3＋1，V/V)：取300 mL乙腈，加入100 mL甲苯，摇匀备用。 4.3 标准品
4.3.1 农药标准物质：标准物质清单见附录A，标准物质纯度≥95%。
4.4 农药标准溶液
4.4.1 标准储备溶液：准确称取适量标准品（精确至0.1 mg），用丙酮溶解，配制成浓度为500 μg/mL
的标准储备溶液，-18℃冷冻避光保存，有效期3个月。
4.4.2 混合标准中间溶液：将110种农药分成五个组，分组情况见附录A。移取一定体积的标准储备溶液用丙酮配制成10 mg/L 的混合标准溶液，，4℃冷藏避光保存，有效期1个月。
4.4.3基质混合标准工作溶液：分别移取一定体积的混合标准溶液，添加至经过7.1～7.2步骤净化后的空白样品基质溶液，混匀，用丙酮定容至1.0 mL 。基质混合标准工作溶液应现用现配。
4.5 材料
4.5.1 助滤剂：celite 545，或相当者。
4.5.2 以石墨化非多孔碳/酰胺丙基甲硅烷基化硅胶为填料的固相萃取柱：Envi-Carb/LC-NH2 ,500 mg / 500 mg ,6 mL,或相当者。
5 仪器和设备
5.1 分析天平：感量0.01 g和0.0001 g。
5.2 固相萃取装置。
5.3 样品粉碎机：配 20 目样品筛。
5.4 振荡器。
5.5 抽滤装置。
5.6 旋转蒸发仪。
5.7 氮吹仪。
5.8 涡旋振荡器。
5.9 气相色谱-质谱仪：配有电子轰击电离源（EI）。
5.10 凝胶渗透色谱仪：配凝胶色谱柱（Bio-beads S-X3, 300 mm × 25 mmID ）。
6 试样制备与保存
6.1 试样制备
取代表性试样 500 g ,取样部位按GB 2763附录A执行，用粉碎机粉碎并使其全部通过20目的样品筛。混和均匀，装入洁净的容器内，密封并标识。
6.2 试样保存
试样于0～4 ℃ 避光保存。取样、制样及保存过程中应防止试样受到污染或者残留农药含量发生变化。
7 分析步骤
7.1 提取
称取试样 20 g （精确至0.01 g）置于锥形瓶中，加入 20 mL 水放置 30 min。加入 80 mL 丙酮，置于振荡器上振荡提取 30 min 。向抽滤装置内加入适量助滤剂，将试样及提取液转移至抽滤装置上，减压抽滤，再用 3 × 5 mL 丙酮洗涤锥形瓶及试样残渣，合并提取液和洗涤液，于 40 ℃ 浓缩至约 20 mL。将上述溶液转移至分液漏斗中，依次向分液漏斗中加入 50 mL 15 %（W/V）氯化钠水溶液，50 mL 二氯甲烷，振荡 5 min ，静置后收集二氯甲烷层并过无水硫酸钠脱水。再加入50 mL二氯甲烷重复上述操作。合并经无水硫酸钠脱水的二氯甲烷，于 40 ℃ 水浴旋转浓缩至近干，再用氮气吹干。用环己烷-乙酸乙酯定容至 4.0 mL,待净化。
7.2 净化
7.2.1 凝胶渗透色谱净化
将7.1中待净化溶液置于凝胶色谱仪上，进样体积为2.0 mL （相当于一半称样量的样品），环己烷-乙酸乙酯作为流动相，流速为 3.0 mL/min,弃去第0～20 mL淋洗液，收集第21～70 mL 淋洗液，于 40 ℃ 水浴旋转浓缩至近干，再用氮气吹干。用2 mL 乙腈-甲苯溶液溶解残渣。
7.2.2 固相萃取净化
将Envi-Carb/LC-NH2 固相萃取柱置于固相萃取装置上。用10 mL 乙腈-甲苯溶液预淋洗。将经7.2.1净化的溶液移入固相萃取柱同时即开始收集淋洗液，用 3×1 mL 乙腈-甲苯溶液洗涤容器并移入固相萃取柱，并调节装置使淋洗液流速约为 2 mL/min。再用 20 mL 乙腈-甲苯溶液洗涤固相萃取柱，合并淋洗液。于 40 ℃ 水浴旋转浓缩至近干，再用氮气吹干。用丙酮定容至1.0 mL，供气相色谱-质谱测定。
7.3 测定
7.3.1 气相色谱-质谱参考条件
a） 色谱柱：DB-5MS（30m×0.25mm×0.25μm）石英毛细管柱或相当者；
b） 色谱柱温度：60 ℃ 保持2 min ，先以25℃/min 升温至130℃，然后以4℃/min 升温至180℃，再以6℃/min 升温至300℃，保持10 min ；
c） 载气：氦气，纯度≥99.999%，流速 1.0 mL/min；
d） 进样口温度：250 ℃；
e） 进样量：2 μL；
f） 进样方式：脉冲不分流进样，脉冲压力20 psi，保持1.5 min；
g） 电子轰击电离源：70 eV ；
h） 离子源温度：230 ℃ ；
i） 四极杆温度：150 ℃ ；
j） GC-MS接口温度：280 ℃ ；
k） 溶剂延迟时间：7 min ；
l） 选择离子监测：每种农药选择1个定量离子，1～3个定性离子，依据农药的保留时间分组检测。农药的保留时间、定量离子、定性离子参见附录B。每组检测离子的分组时间和驻留时间参见附录C。
7.3.2 定性测定
进行样品测定时，如果样品质量色谱图中出现与标准物质保留时间一致的色谱峰，且在扣除背景后，该色谱峰对应的质谱图中出现所选择的离子（离子丰度比与标准物质离子丰度比的偏差满足残留分析要求），则可以判断样品中存在这种农药。
7.3.3 定量测定
为减少基质对定量结果的影响，本方法采用空白样品溶液配置基质混合标准工作溶液，外标法定量测定。样品中农药响应值应在基质混合标准工作溶液线性范围内。本方法标准物质在各类粮谷基质中选择离子监测GC-MS质量色谱图参见附录D。
7.4 平行试验
按照上述步骤对同一试样进行平行试验。
7.5 空白试验
除不称取试样外，均按照上述步骤进行。
8 结果计算和表述
试样中农药残留量可由GC-MSD数据处理软件计算，或按照公式（1）计算，（计算结果需将空白值扣除。）
式中：
Xi—试样中农药残留量，单位为毫克每千克，mg/kg；
A —样液中农药定量离子色谱峰的峰面积；
c —基质标准溶液中农药的浓度，单位为毫克每升，mg/L；
V —样液最终定容体积，单位为毫升，mL；
As —基质标准溶液中农药定量离子色谱峰的峰面积；
m —最终溶液相当的试样质量，单位为克，g。
注：计算结果需将空白值扣除，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。
9 精密度
9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录F的要求。
9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录G的要求。
10 定量限和回收率
10.1 定量限
采用本方法对大米、糙米、大麦、小麦和玉米5种食品中110种农药残留进行测定，各种农药的测定低限均为0.01mg/kg。
10.2 回收率
采用本方法对大米、糙米、大麦、小麦和玉米5种食品进行添加回收实验，添加水平为 0.01 mg/kg，0.05 mg/kg，0.1 mg/kg，110种农药在5种食品中的添加回收率见附录E。
