GB 23200.39-2016 食品安全国家标准
食品中噻虫嗪及其代谢物噻虫胺残留量的测定
液相色谱-质谱_质谱法
前言
本标准按照GB/T 1. 1-2009给出的规则起草。
本标准代替SN/T 3139-2012《出口农产品中噻虫嗪及其代谢物噻虫胺残留量的测定 液相色谱质谱/质谱法》。与SN/T 3139-2012相比，主要变化如下：
——标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；
——标准名称中“出口农产品"改为“食品"；
——标准范围中增加“其他食品可参照执行"。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：
——SN/T 3139-2012。
1范围
本标准规定了食品中噻虫嗪和噻虫胺残留量的液相色谱-质谱/质谱检测方法。
本标准适用于大米、大豆、板栗、菠菜、油麦菜、洋葱、茄子、马铃薯、柑橘、蘑菇、茶等植物源性产品和鸡肝、猪肉、牛奶等动物源性产品中噻虫嗪、噻虫胺残留量的检测和确证。其他食品可参照执行。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不ke少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 2763食品安全国家标准 食品中农药最大残留xian量
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
用0.1%乙酸-乙腈超声提取试样中的噻虫嗪和噻虫胺残留物，采用基质分散固相萃取剂净化，超高效液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。
4试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为色谱级，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。
4.1 试剂
4.1.1乙腈（CH3CN）。
4.1.2乙酸铵（CH3COONH4）。
4.1.3乙酸（CH3COOH）：分析纯。
4.1.4甲酸（HC0OH）。
4.1.5甲醇（CH3OH）。
4.1.6正已烷（C6H14）。
4.1.7无水硫酸镁（MgSO4）：分析纯。
4.1.8无水硫酸钠（Na2SO4）：分析纯。
4.1.9 N -丙基乙二胺（PSA）吸附剂：粒径40μm~60μm。
4.1.10石墨化炭黑吸附剂（GCB）：粒径 120μm~400μm。
4.1.11 十八烷基硅烷（ODS）键合相吸附剂（C18）：粒径40μm ~60μm。
4.1.12基质分散固相萃取剂：
a） 针对大米、茄子、洋葱、马铃薯、柑橘样品：50 mg PSA、150 mg MgSO4；
b） 针对菠菜、油麦菜样品：50 mg PSA、150 mg MgSO4、10 mg GCB；
c） 针对板栗、蘑菇、牛奶样品：50mgPSA、150mgMgSO4、50mgC18；
d） 针对茶叶、大豆样品：50 mg PSA、150 mg MgSO4、50 mg C18、10 mg GCB；
e） 针对鸡肝、猪肉样品：50 mg PSA、150 mg MgSO4、50 mg C18。
4.2溶液配制
4.2.1 0. 1%乙酸-乙腈溶液：取1 mL乙酸，加入乙腈定容到1 000 mL，混匀。
4.2.2 10 mmol/L乙酸铵溶液（含0. 1%甲酸）：准确称取0.16 g乙酸铵于200 mL容量瓶中，先用少量水溶解后加入200μL甲酸，再用水定容至刻度，混匀，现用现配。
4.3标准品
4.3.1噻虫嗪标准品（ thiamethoxam）：CAS号：153719-23-4，分子式C8 H10ClN5O3S，相对分子质量291. 7，纯度≥99%。
4.3.2噻虫胺标准品（clothianidin）：CAS号： 205510-53-8，分子式C6H8ClN5O2S，相对分子质量250. 2，纯度≥99%。
4.4标准溶液配制
4.4.1噻虫嗪标准储备溶液：准确称取适量的噻虫嗪标准品（精确至0.01mg），用乙腈溶解，配制成1000μg/ml的标准储备溶液，-18℃下保存。
4.4.2噻虫胺标准储备溶液：准确称取适量的噻虫胺标准品（精确至0.01mg）用乙腈溶解，配制成1000 μg/mL的标准储备溶液，-18℃下保存。
4.4.3噻虫嗪和噻虫服混合标准工作溶液：根据需要分别取适量噻虫嗪标准储备溶液和塞虫胺标准储备溶液，用乙腈稀案成1μg/mL标准工作溶液，-18℃下保存。
4.4.4基质空白容液：将不同基质的阴性样品分别按照“提取与净化"处理后得到的溶液。
4.4.5基质标准工作液：根据实验需要吸取适量混合标准工作溶液，用基质空白溶液稀释成适当浓度的标准工作液，现用现配。
4.5材料
微孔滤膜：尼龙，13 mm（内径），0.2μm。
5仪器和设备
5.1超高效液相色谱-串联质谱仪配有电喷雾离子源（ESI）。
5.2 粉碎机。
5.3组织捣碎机。
5.4 分析天平：感量分别为0.01mg和0.01g。
5.5超声波振荡器。
5.6涡旋振荡器。
5.7离心机：转速≥4 000 r/ min。
5.8离心管：具塞，聚四氟乙烯，50 mL。
5.9分液漏斗：100 mL，具塞。
6试样制备与保存
6.1取样部位
样品取样部位按GB 2763的规定执行。在取样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生农药残留含量的变化。
6.2 试样制备
6.2.1 大米、大豆、板栗、茶叶
取代表性样品500 g，用粉碎机粉碎。混匀，均分成2份作为试样，分装，密闭，于0℃~4℃保存。
6.2.2菠菜、油麦菜、洋葱、茄子、马铃薯、柑橘、蘑菇
取代表性样品1000g，将其（不可用水洗涤）切碎后，依次用捣碎机将样品加工成浆状。混匀，均分成2份作为试样，分装，密闭，于0℃~4℃保存。
6.2.3鸡肝、猪肉
取代表性样品500g，将其切碎后，依次用捣碎机将样品加工成浆状，混匀，均分成2份作为试样，分装，密闭，于-18℃保存。
6.2.4 牛奶
取代表性样品约500 g，混匀，均分成2份作为试样，分装，密闭，于0℃~4℃保存。
7分析步骤
7.1 提取与净化
7.1.1 大米、大豆、板栗、洋葱、菠菜、油麦菜、茄子、马铃薯、柑橘、蘑菇、茶叶、牛奶
称取5g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，如果为干燥样品则加5mL~8mL水，视具体样品而定，浸泡0.5h。加入乙酸-乙腈溶液使乙腈和水总体积为20 mL，均质0. 5 min，摇匀，在40℃以下超声提取30 min，4 000r/ min离心10 min。取上清液1. 0 mL，加适量基质分散固相萃取剂净化，剧烈振摇1min，40000r/min离心10min，取上清液用0.2μm滤膜过滤，用液相色谱-质谱/质谱仪测定。
7.1.2 鸡肝、猪肉
称取5g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入约3g无水硫酸钠，混匀，加入10mL乙酸乙腈溶液，10 mL正已烷，均质3 min，4 000 r/ min离心10 min，转移提取液到分液漏斗中，充分摇匀后静置分层，收集乙腈层。按同样操作重复提取一次。用10 mL乙腈洗涤正己烷层，摇匀后静置分层，收集乙腈层。合并3次收集的乙腈层，在40℃下旋蒸至近干，用乙酸-乙腈溶液定容到20mL，取1.0mL，加适量基质分散固相萃取剂净化，剧烈振摇1 min，4 000 r/ min离心10 min，取上清液用0. 2μm滤膜过滤，用液相色谱-质谱/质谱仪测定。
7.2 测定
7.2.1 液相色谱参考条件
a）液相色谱柱： ACQUITY UPLC BEH C18，50 mm×2.1 mm（内径），粒度1.7μm，或性能相当者；
b） 柱温：35℃；
c） 流动相梯度：见表1；
d） 进样量：2.0μL；
e） 样品室温度：10℃。
7.2.2质谱参考条件
参见附录A。
7.2.3 标准曲线的配制
以5.0g空白样品通过前处理步骤制备基质空白溶液，将标准中间溶液稀释至2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL、100.0ng/mL，不过原点做基质标准工作曲线，宜现用现配。
7.2.4 定量测定
采用外标校准曲线法定量测定。为减少基质对定量测定的影响，定量用标准曲线应采用基质混合标准工作溶液绘制的标准工作曲线，并且保证所测样品中农药的响应值均在线性范围以内。在7.2.1~7.2.2规定的条件下，噻虫嗪和噻虫胺的保留时间分别约为2.51min和2.92min，多反应离子监测色谱图参见图B.1。
7.2.5定性测定
在7.2.1~7.2.2规定的条件下进行测定，试液中待测物的保留时间应在标准溶液保留时间的时间窗内，各离子对的相对丰度应与标准品的相对丰度一致，误差不超过表2中规定的范围。噻虫嗪和噻虫胺标准品的多反应离子监测色谱图参见图B.1。
表2定性测定时相对离子丰度最大容许偏差
单位为百分率
相对丰度（基峰） | ＞50 | 20~50（含） | 10~20（含） | ≤10 |
允许的相对偏差 | ±20 | ±25 | ±30 | ±50 |
7.3空白试验
除不加试样外，均按7.1~7.2规定的步骤执行。
8结果计算和表述
液相色谱-质谱/质谱法测定试样中噻虫嗪或噻虫胺农药的残留量采用标准曲线法定量，标准曲线法定量结果按式（1）计算
式中：
Xi——试样中噻虫滕或噻虫胺农药的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
ci——从标准曲线上得到的被测组分溶液浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；
V——样品提取液的体积单位为毫升（mL）（本方法中为20.0mL）；
m——最终样品溶液所代表试样的质量，单位为克（g）。
计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留2位有效数字。
9精密度
9.1在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率） ，应符合附录C的要求。
9.2在再现性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D的要求。
10 定量限和回收率
10.1 定量限
本方法对噻虫嗪和噻虫胺的测定低限为0. 010 mg/ kg。
10.2回收率
本方法的添加浓度和回收率参见附录E。
