中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 0148-2011
代替SN 0148-1992 、SN 0153-1992、SN 0154-1992、SN 0155-1992、SN 0161-1992等
进出口水果蔬菜中有机磷农药残留量检测方法
气相色谱和气相色谱-质谱法
1范围
本标准规定了水果蔬菜中敌敌畏、乙酰甲胺磷、硫线磷、百治磷、乙拌磷、乐果、甲基对硫磷、毒死蜱、嘧啶磷、倍硫磷、丙虫硫磷、辛硫磷、灭菌磷、三硫磷、三唑磷、哒嗪硫磷、亚胺硫磷、敌百虫、灭线磷、甲拌磷、氧化乐果、内吸磷、二嗪磷、地虫硫磷、异稻瘟净、氯唑磷、 甲基毒死蜱、对氧磷、杀螟硫磷、溴硫磷、乙基溴硫磷、噻唑磷、丙溴磷、乙硫磷、敌瘟磷、吡唑硫磷、蝇毒磷、甲胺磷、治螟磷、特丁硫磷、久效磷、除线磷、皮蝇磷、甲基嘧啶磷、对硫磷、甲基毒虫畏、异柳磷、稻丰散、杀扑磷、甲基硫环磷、伐杀磷、伏杀硫磷、甲基谷硫磷、二溴磷、速灭磷、甲基乙拌磷、巴胺磷、乙嘧硫磷、磷胺、地毒磷、马拉硫磷、甲基异柳磷、水胺硫磷、喹硫磷、杀虫畏、碘硫磷、硫环磷、威菌磷、苯硫磷、乙基谷硫磷70种有机磷类农药残留量的气相色谱及气相色谱-质谱检测方法。
本标准适用于菠萝、苹果、荔枝、胡萝卜、马铃薯、茄子、菠菜、荷兰豆、鲜木耳、鲜蘑菇、鲜牛蒡、鲜香菇、大葱中上述70种有机磷类农药残留量的检测。
2方法提要
样品中有机磷农药残留经乙腈提取，过Envi-Carb/PSA小柱净化，浓缩、定容后，用气相色谱法（GC- FPD）和气相色谱-质谱法（GC-MS）测定，外标法定量。
3试剂材料
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为去离子水。
3.1 乙腈：液相色谱纯。
3.2 丙酮：液相色谱纯。
3.3甲苯：液相色谱纯。
3.4乙酸乙酯：液相色谱纯。
3.5丙酮-甲苯（65+35，体积比）：量取65 mL丙酮（3.2）和35 mL甲苯（3.3），混匀。
3.6无水硫酸镁：550℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。
3.7氯化钠：140℃烘烤4 h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。
3.8 Envi-Carb/PSA复合小柱：500mg/500mg/6mL（本标准中是使用Sigma-Aldrich/Supelco公
司产品完成的（非商业性声明：此处列出公司名字仅为工作方便提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家的产品。）），或相当者。
3.9 70种有机磷类农药标准物质：纯度均≥95% ，详细见表A.1。
3.10 标准溶液：
3.10.1标准储备溶液：分别准确称取10.0mg（按其纯度折算为100%）的农药各标准物质（3.9）于小烧杯中，用少量丙酮溶解，转移至100 mL容量瓶中，再用少量乙酸乙酯洗涤小烧杯数次，洗涤液倒入容量瓶中并用乙酸乙酯定容至刻度，混匀，配成标准储备溶液浓度为100mg/mL。0℃~4℃冷藏保存，备用。
3.10.2 混合标准储备液：将70种有机磷农药分为4组，按照表B.1中的组别，根据各农药在仪器上的响应值，逐一准确吸取一定体积的同组别的单个农药储备液分别注入同一容量瓶中，用乙酸乙酯稀释至刻度，配制成4组农药混合标准储备溶液。气相色谱图参见图C.1~图C.4。
3.10.3混合标准工作溶液：使用前用乙酸乙酯将混合标准储备液稀释成所需浓度的标准工作液。
4仪器和设备
4.1气相色谱仪：配火焰光度检测器（FPD磷滤光片）。
4.2气相色谱质谱仪：配有电子轰击电离源（EI）。
4.3分析天平：感量0.1mg和0.01g。
4.4 容量瓶：100mL，10mL。
4.5移液器：20μL~200μL和100μL~1 000μL。
4.6 玻璃离心管：50mL和15mL具塞
4.7 10mL玻璃刻度试管。
4.8旋涡混合器。
4.9 离心机（4000r/min）。
4.10 氮吹浓缩仪。
4.11 均质器。
4.12捣碎机。
5样品制备与保存
从所取全部样品中取出有代表性样品可食部分约500 g，用捣碎机全部磨碎混合均匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于-18℃以下冷冻存放。在样品制备操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
6提取及净化
6.1 提取
称取均质试样10 g（精确到0.01g），置于50mL玻璃离心管中，加入10 mL乙腈溶液，高速均质2 min，再加入约4g无水硫酸镁和1 g氯化钠，盖上塞子剧烈振荡2 min后，以4000r/min的转速离心4 min，取出乙腈层装入另一50mL离心管，用10 mL乙腈重复提取一次，合并提取液，并加入1 g无水硫酸镁，剧烈振荡后，以4000 r/min的转速离心1 min，移出上清液并浓缩至约1 mL（45℃氮吹），待净化。
6.2净化
将ENVI-Carb/PSA小柱（3.8）装在固相萃取装置上，先用5 mL丙酮-甲苯混合溶剂（3.5）预满洗小柱，保持流速约为1mL/min。将6.1提取液通过小柱，再用10mL丙酮-甲苯混合溶列洗脱，收集全部洗脱液于10mL玻璃刻度试管，置于40℃下氮吹至近0.5 mL，用乙酸乙酯定容至1.0mL供GC-FPD或GC-MS分析。
6.3测定
6.3.1 仪器条件
6.3.1.1 气相色谱仪器条件（GC-FPD）：
a） 色谱柱：DB-17（30m×0.53mm×0.25μm）石英毛细管柱或相当者；
b） 柱箱升温程序：100℃保持0.5 min，然后以15℃/min升温至250℃，保持20 min；
c） 载气：氮气，纯度≥99.999% ，恒流模式， 流量为10mL/min；
d） 进样口温度：200℃；
e） 进样量：2μL；
f） 进样方式：不分流进样；
g） 检测器温度：250℃。
6.3.1.2 气相色谱-质谱仪器条件（GC-MS）：
a） 色谱柱：DB-5MS（30m×0.25 mm×0.25μm）石英毛细管柱或相当者； ：
b） 柱箱升温程序：60℃保持6min，然后以10℃/min升温至250℃，再以15℃/min升温至280℃，保持6 min；
c） 载气：氦气，纯度≥99. 999%，恒压模式，压力为120 kPa；
d） 进样口温度：220℃；
e） 进样量：1μL；
f） 进样方式：不分流进样，1.0 min后打开分流阀和隔垫吹扫阀；
g） 电子轰击电离源（EI）：70 eV；
h） 离子源温度：200℃；
i） GC-MS接口温度250℃；
j） 选择离子监测：每个目标化合物选择1个定量离子和2个~3个定性离子，详参见表D.1，每组所有需要检测离子按照出峰顺序，分时段分别检测。每组检测离子的开始时间和驻留时间参见表E.1。气相色谱质谱选择离子色谱图参见图E.1~图F.4。
6.3.2气相色谱法测定
在仪器最佳工作条件下，气相色谱采用外标法定量。根据样液中被测物残留的含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中被测物的响应值应在仪器的线性范围内，如果含量超过标准曲线范围，应稀释到合适浓度后分析。对标准工作榕液和样液等体积参差进样测定。在6.3.1.1色谱条件下，70种有机磷农药在气相色谱仪上的保留时间、方法的检出限参见附录B中的表B.1，气相色谱图参见图C.1~图C.4。如检测结果出现阳性，建议使用其他准确定量方法进行测定。
6.3.3 气相色谱-质谱法测定
按6.3.1.2色谱质谱条件下进行样品测定，如果样液保留时间与标准溶液相一致（±0.5%），并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且所选择的离子峰度比与标准样品的离子相一致，则可判断样品中存在这种被测物。使用气相色谱质谱定性分析时相对离子丰度最大允许误差见表1。
6.3.4 空白试验
除不加试样外，按上述测定步骤进行。
7结果计算与表述
试样中每种有机磷农药残留量按式（1）计算。
式中：
Xi——试样中每种有机磷农药残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
Ai——样液中每种有机磷农药的峰面积（或峰高）；
Ais——标准工作液中每种有机磷农药的峰面积（或峰高）；
Ci——标准工作液中每种有机磷农药的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；
V——样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；
m——最终样液代表的试样质量，单位为克（g）。
8测定低限与回收率
8.1、测定低限
本方法中气相色谱法对菠萝、苹果、荔枝、胡萝卜、马铃薯、茄子、菠菜、荷兰豆、鲜木耳、鲜蘑菇、鲜牛蒡、鲜香菇、大葱中70种农药的测定低限参见表B.1，气相色谱质谱法的测定低限参见表D.1。
8.2 回收率
菠萝、苹果、荔枝、胡萝卜、马铃薯、茄子、菠菜、荷兰豆、鲜木耳、鲜蘑菇、鲜牛蒡、鲜香菇、大葱中70种农药不同添加水平的平均回收率数据参见表G.1。
