中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 2918-2011
出口食品中亚硫酸盐的检测方法 离子色谱法
Determination of sulfite in food for export-
Ion chromatography method
1范围
本标准规定了出口食品中亚硫酸盐残留量的离子色谱检测方法。
本标准适用于白砂糖、饼干、果脯、虾肉、柠檬茶饮料、啤酒、淀粉、葡萄、辣椒、白萝卜、魔芋精粉中亚硫酸盐残留量的检测。
2规范性引用文件
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GB/T 601化学试剂 标准滴定溶液的制备
3方法提要
3.1 辛辣类食品、高蛋白食品、高吸水膨胀性食品:在密闭容器中对样品进行酸化，在氮气流的保护下蒸馏，释放出其中的二氧化硫，释放物用甲醛溶液吸收，将吸收液用配有电导检测器的离子色谱仪测定，外标法定量。
3.2 除3.1以外的食品:用碱将食品中结合型的亚硫酸释放出来，与甲醛生成稳定的羟甲基磺酸，经ENVI-CARB活性碳小柱除去提取液中的色素，石油醚除去提取液中的油脂，用配有电导检测器的离子色谱仪测定，外标法定量。
4试剂和材料
除特殊说明之外，所有试剂均为分析纯，所用水均为超纯水(电阻率为18.2MΩ·cm)。
4.1无水碳酸钠:基准试剂。
4.2 氢氧化钠:优级纯。
4.3石油醚:色谱纯。
4.4甲醛:37%.
4.5磷酸:≥85%。
4.6 氢氧化钠溶液(1.0 mol/L):称取4.0g氢氧化钠，溶解，定容至100 mL。
4.7磷酸溶液:1+1(体积比)。
4.8 Na2CO3-NaOH混合溶液:Na2CO3为8 mmol/L、NaOH为2.5 mmol/L。称取0.848g无水碳酸钠溶解，并吸取2.5 mL 1.0 mol/L的氢氧化钠(4.6)于容量瓶中，定容至100 mL。
4.9亚硫酸钠标准品(sodium sulfite，分子式:Na2SO3，CAS编号:7757-83-7):含量需根据亚硫酸钠纯度校正，校正方法参见附录A。
4.10二氧化硫标准储备溶液(1000 μg/mL) :准确称取0.1969g亚硫酸钠溶解，并吸取2.0mL甲醛于容量瓶中，定容至100 mL。
4. 11 二氧化硫标准稀释液(100μg/mL):吸取二氧化硫标准储备溶液(4.10)10.0 mL，加入2.0 mL 甲醛，用水定容至100 mL。
4. 12 二氧化硫标准工作曲线溶液:分别取二氧化硫标准稀释液(4.11)0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、
2.0mL、3. 0 mL.4.0mL、6.0mL于100 mL的容量瓶中，加入2.0 mL甲醛，用水定容至刻度，该标准工作曲线浓度为0.2 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL、2.0 μg/mL、3.0 μg/mL、4.0 μg/ mL、6.0 μg/mL。
4.13 ENVI-CARB 石墨化碳黑小柱:0.25 g，或相当者。
4.14水相滤膜:0.2μm。
5仪器和设备
5.1离子色谱仪:配电导检测器。
5.2离心机:转速不低于9000r/min。
5.3组织捣碎机。
5.4 涡旋振荡器。
5.5 天平:感量分别为0.01g和0.0001g。
5.6 pH计。
5.7 全玻璃蒸馏器。
5.8 超滤器:截留相对分子质量10000，使用容量为4 ml样品杯。
6试样制备和保存
6.1试样制备
6.1.1水果蔬菜类
取葡萄、果脯、白萝卜、辣椒等水果及蔬菜样品至少500g，或去皮、去壳、去根、去冠、去茎(不可水洗)，将可食部分切碎后，用组织捣碎机将样品加成浆状，混匀后均分为两份作为试样，分装入洁净盛样袋内，密闭并标识。
6.1.2 饼干类
取饼干类样品至少300g，用粉碎机粉碎并通过2.0 mm圆孔筛，混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净盛样袋内，密闭并标识。
6.1.3 肉及肉制品
取肉及肉制品至少500g，切碎后用组织捣碎机将样品加工成浆状，混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净盛样袋内，密闭并标识。
6.1.4 淀粉、魔芋精粉、白砂糖类
6.1.4.1取淀粉、魔芋精粉样品至少500g，充分混匀后，通过2.0 mm圆孔筛，均分成两份作为试样，分装入洁净盛样袋内，密闭并标识。
6.1.4.2 取有代表性白砂糖样品至少500g，充分混匀后，均分成两份作为试样，分装入洁净盛样袋内，密闭并标识。
6.1.5 啤酒、柠檬茶饮料类
取啤酒、柠檬茶饮料类样品至少500 g，混匀后，均分成两份作为试样，分装入洁净容器内，密闭并标识。
6.2试样保存
6.2.1 饼干类、淀粉、魔芋精粉、白砂糖类、啤酒、柠檬茶饮料类、水果蔬菜等试样在4℃保存；肉和肉制品等试样在-18℃保存。
6.2.2在制样过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
7测定步骤
7.1 提取
7.1.1 啤酒、白砂糖、淀粉、果脯、饼干样品
准确称取2.5g均匀试样(精确至0.001 g)置于50mL的具塞刻度塑料离心管中，以少量水润湿，加入1.0 mol/L氢氧化钠溶液(4.6)1.0mL，摇匀，加入10mL甲醛，以水稀释至25 mL。在涡旋振荡器上混匀5 min，以9 000 r/min离心30min。上清液备用。
7.1.2柠檬茶饮料、葡萄等酸性样品
准确称取2. 5g均匀试样(精确至0.001 g)于50 mL具寒刻度料离心管中，加入 15 mL水和1.0 mol/L氢氧化钠溶液1.0mL，摇匀，加入1.0mL甲醛，摇勾，以1.0 mol/L氢氧化钠溶液(4.6)调节稀释液的pH大于11，摇匀，以水稀释至2 mL。在涡旋振荡器上混匀5 min，以9 000 r/min离心30 min。上清液备用。
7.1.3 辣椒、虾、白萝卜、魔芋精粉等辛辣类食品、高蛋白食品、高吸水膨胀性的样品
按图1所示，连接测定装置。K管通入氮气，F管通入冷却水，在1 000 mL的圆底烧瓶C中加入500mL水，1000mL的圆底蒸馏烧瓶E中加入50mL水，在200mL的茶色容量瓶G中加入的吸收液为8mL甲醛和7 mL水，冷凝管下端应插入吸收液中。称取粉碎均匀的样品10 g(精确至0.001 g)置于圆底蒸馏烧瓶E中，快速加入20 mL磷酸溶液(4.7)，随即盖上瓶塞。接通N2保护，控制其流量为500 mL/min~ 2000 mL/min，经缓冲瓶B、弯管I通入圆底蒸馏烧瓶E；打开电炉加热瓶C，使瓶内溶液保持沸腾，产生的水蒸气由T型管J通入圆底蒸馏烧瓶E，T型管下端连接一段带有螺旋夹L的乳胶管，打开螺旋夹L，可以及时放掉蒸汽冷凝形成的水滴；待馏出液达到容量瓶G的刻度线时停止接收，混匀后供离子色谱仪测定。
7.2净化
7.2.1饼干等含油脂较多的样品
取出上清液(7.1.1)10mL于另一50 mL具塞塑料离心管中，加入10 mL石油醚，在涡旋振荡器上混匀1 min，以9 000r/min离心10min。弃去上层有机相，再加入10mL的石油醚，重复提取一次。弃去上层有机相，收集下清液。
7.2.2 果脯、葡萄、柠檬茶饮料等含色素较多的样品
取上清液(7.1.1、7.1.2) 5 mL过ENVI-CARB石墨化碳黑小柱(以5 mL水预淋洗)，调整流速在1.5mL/min左右，弃去前3mL样品流出液，收集后2mL样品溶液于具塞玻璃管中备用。
7.2.3超滤法去除样品提取液中的水溶性大分子
将7.1.1、7.2.1、7.2.2中收集液经0.2 μm的水相滤膜过滤后，注入5.8超滤器样品杯中，于9000r/min下离心30min进行超滤，超滤液供离子色谱仪测定。
注1:如样品中的二氧化硫含量高，超出标准工作曲线的浓度范围，可减少样品的取样量或增加其稀释倍数。
注2，由于亚硫酸盐容易氧化成硫酸盐，因此样品和标准溶液都应是新鲜配制的，并减少暴露在空气中的时间。样品和标准溶液在甲醛稳定液中的稳定时间是24h。样品开封后应尽快分析。
7.3离子色谱测定
7.3.1色谱条件
7.3.1.1 色谱柱: AS 9-HC高容量阴离子分离柱，4 mm×250 mm(带AG9-HC，4 mm×50 mm保护柱)，或性能相当的离子色谱柱。
7.3.1.2 流动相:8 mmol/L Na2CO3-2.5 mmol/L NaOH。
7.3. 1.3 流速:1.0 mL/ min。
7.3.1.4抑制器:4mm阴离子抑制器；外加水抑制模式，抑制电流50mA。
7.3.1.5检测器:电导检测器，检测池温度为30℃。
7.3.1.6 进样量:进样25 μL(可根据样液中二氧化硫含量进行调整)。
7.3.2 测定
根据样液中二氧化硫含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液，标准工作溶液和待测样液中二氧化硫的响应值均应在仪器检测的线性范围内。标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定。在上述色谱条件下二氧化硫的保留时间约为16.6min，标准品的色谱图参见图B.1。
8结果计算和表述
按式(1)计算样品中二氧化硫的残留含量:
式中:
X——试样中二氧化硫的残留含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；
A——样液中二氧化硫的峰面积；
c——标准工作液中二氧化硫的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；
V——样液最终定容体积，单位为毫升(mL)；
AS——标准工作液中二氧化硫的峰面积；
m——最终样液所代表的试样质量，单位为克(g)。
若结果以亚硫酸钠计时，除以系数0.508。
9测定低限、回收率
9.1测定低限
本方法的测定低限为4.0 mg/kg。
9.2 回收率
二氧化硫添加浓度及回收率的实验数据见表1。
