中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 4606-2016
食品接触材料 高分子材料
食品模拟物中邻苯二甲酸酯类增塑剂的测定 液相色谱-质谱/质谱法
Food contact materials-Polymers-Determination of phthalic acid esters in food simulants-Liquid chromatography-tandem mass spectrometry
1范围
本标准规定了食品模拟物中20种邻苯二甲酸酯类增塑剂的液相色谱-质谱/质谱测定方法。
本标准适用于水、3%乙酸溶液、10%乙醇溶液、20%乙醇溶液、50%乙醇溶液和橄榄油6种食品模拟物中20种邻苯二甲酸酯类增塑剂的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可（ke）少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 23296.1食品接触材料 塑料中受限物质 塑料中物质向食品及食品模拟物特定迁移试验和含量测定方法以及食品模拟物暴露条件选择的指南
3方法提要
将浸泡过高分子材料的水、3%乙酸溶液、10%乙醇溶液、20%乙醇溶液和50%乙醇溶液5种水基食品模拟物的浸泡液，直接采用液相色谱质谱/质谱仪测定。橄榄油浸泡液经乙腈萃取后再采用液相色谱-质谱/质谱仪测定。
4试剂和材料
除另有说明外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.1甲醇：色谱纯。
4.2无水乙醇。
4.3甲酸：色谱纯。
4.4乙腈：色谱纯。
4.5冰乙酸。
4.6乙酸铵。
4.7 20种邻苯二甲酸酯类增塑剂标准品（参见附录A中表A.1），纯度≥98%。
4.8食品模拟物，包括水性模拟物和油性模拟物：
a）蒸馏水；
b）3%乙酸溶液：称取30.0 g冰乙酸（4.5）溶于水中，并定容至1 000 mL；
c）10%乙醇溶液：量取100 mL无水乙醇（4.2），加入900 mL水混合均匀；
d）20%乙醇溶液：量取200 mL无水乙醇（4.2），加入800 mL水混合均匀；
e） 50%乙醇溶液：量取500 mL无水乙醇（4.2），加入500 mL水混合均匀；
f）精制橄榄油。
4.9邻苯二甲酸酯类增塑剂标准储备溶液：准确称取邻苯二甲酸酯类增塑剂标准品（4.7）各0.0125g（精确至0.000 1 g），分别置于25 mL棕色容量瓶中，用甲醇（4.1）溶解稀释至刻度，混匀。该溶液的浓度为500 mg/L。在4℃下避光密闭保存，保存期为1个月。
4.10 20种邻苯二甲酸酯类增塑剂混合标准中间液：准确移取邻苯二甲酸酯类增塑剂标准储备溶液（4.9）2.0ml于100mL棕色容量瓶中，用甲醇（4.1）定容至刻度，得到浓度为10mg/L的标准中间液，4℃下保存，备用。
4.11 邻苯二甲酸二烯丙酯（DAP）标准中间液：准确移取浓度为500 mg/L邻苯二甲酸二烯丙酯标准储备溶液（4.9） 2.0 ml于100 mL棕色容量瓶中.用甲醇（4.1）定容至刻度，得到浓度为10 mg/L的DAP标准中间液，4℃下保存，备用。
4.12有机相微孔滤膜：孔径0.2 μm。
5仪器
5.1液相色谱质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI源）。
5.2涡旋混合器。
5.3分析天平：感量0.1 mg。
5.4 离心管：具塞，带刻度，10 mL，25 mL。
5.5 容量瓶：10 mL，25 mL，100 mL。
6试样的制备与处理
6.1迁移试验
根据待测样品的预期用途和使用条件，按GB/T 23296.1的迁移试验方法及试验条件，用适当的模拟物（4.8）进行邻苯二甲酸酯类增塑剂的迁移试验。
6.2食品模拟物试液的处理
对于水基食品模拟物试液，取适量模拟液经0.2μm滤膜过滤后，供液相色谱质谱/质谱仪检测。对于橄榄油试液，准确称取2.0 g（精确至0.1 mg） 橄榄油试液于10 mL具塞玻璃试管中，加入2.0 mL乙腈溶液（4.4），摇匀后在涡旋混合器混匀5 min，静置分层，用注射器吸取上层溶液，经0.2 μm滤膜过滤后，供液相色谱质谱/质谱仪测定。
6.3 标准工作溶液的制备
6.3.1水基食品模拟物标准工作溶液
准确移取1 μL邻苯二甲酸二烯丙酯（DAP）标准中间液（4.11）于10 mL容量瓶中，分别用迁移试验中所选用的水基食品模拟物定容，得到相应介质中邻苯二甲酸二烯丙酯（DAP）的浓度为0.001mg/L的标准工作溶液；准确移取10 μL、20 μL、50 L、100 μL、200 μL、500 μL的20种邻苯二甲酸酯类增塑剂混合标准中间液（4.10）于6个10mL容量瓶中，分别用迁移试验中选用的水基食品模拟物定容，摇匀后得到相应介质中邻苯二甲酸酯类增塑剂的浓度分别为0.01 mg/L、0.02 mg/L、0.05 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L的标准工作溶液。
6.3.2橄榄油标准工作溶液
准确称取20.0 g（精确至0.1 mg）橄榄油至25 mL具塞试管中，向其中加入2 μL邻苯二甲酸二烯丙酯（DAP）标准中间液（4.11），充分混匀后得到浓度为0.001 mg/kg 的邻苯二甲酸二烯丙酯（DAP）标准工作溶液；准确称取2.0 g（精确至0.1 mg）上述橄榄油溶液于10 mL具塞试管中备用。分别准确称取2.0 g（精确至0.1 mg）橄榄油至6个10 mL具塞试管中，准确移取2 μL、4 μL、10 μL、20 μL、40 μL、100 μL的20种邻苯二甲酸酯类增塑剂混合标准中间液（4.10）于试管中，充分混匀后，得到浓度分别为0.01 mg/kg、0.02 mg/kg、0.05 mg/kg、0.10 mg/ kg、0.20 mg/kg、0.50 mg/kg的20种邻苯二甲酸酯类增塑剂混合标准工作溶液。分别在以上7个10 mL具塞试管溶液中加入2.0 mL乙腈（4.4），摇匀后在涡旋混合器混匀5min，静置分层，用注射器吸取上层乙腈溶液，经0.2μm滤膜过滤后，供液相色谱-质谱/质谱测定。
6.4 空白试验
按照6.2的操作处理未与食品接触材料接触的食品模拟物
7测定
7.1 液相色谱-质谱/质谱条件
由于测试结果取决于所使用仪器，因此不可能给出液相色谱质谱/质谱分析的通用参数。设定的参数应保证色谱测定时被测组分与其他组分能够得到有效的分离，下列给出的参数证明是可行的：
a）色谱柱：PoroShell 120 EC-C18柱（100 mm×2.1 mm，2.7μm）或相当者；
b）流动相：A：水，B：甲醇；见表1；
c）流速：0.3 mL/min； .
d）柱温：40℃；
e）进样量：2μL；
f）离子源：电喷雾离子源（ESD）；
g）离子模式：正离子模式；
h）检测方式：多反应监测（MRM）；
i）20种邻苯二甲酸酯类增塑剂的定性离子对、定量离子对和其他质谱参数参见附录B。
7.2绘制标准工作曲线
按照7.1所列测定条件，对标准工作溶液（6.3）进行检测。以食品模拟物标准工作液中邻苯二甲酸酯类增塑剂浓度为横坐标，水基食品模拟物单位以毫克每升（mg/L）表示，橄榄油模拟物以毫克每千克（mg/kg）表示，以对应的峰面积平均值为纵坐标，绘制标准工作曲线。食品模拟物中20种邻苯二甲酸酯类增塑剂的总离子流图参见附录C中图C.1，多反应监测色谱图参见附录D。
7.3 液相色谱质谱分析及阳性结果确证
按照7.1液相色谱-质谱/质谱条件测定样品和标准工作溶液，如果样品的质量色谱峰保留时间与标准品一致，所有选择离子均应出现，则根据定性选择离子对的种类及其相对丰度比，对其进行阳性确证。定性时，其相对丰度允许偏差不超过表2规定的范围，则可判定样品中存在对应的被测物。
对标准工作溶液和食品模拟物试液依次进样，得到邻苯二甲酸酯类增塑剂色谱峰面积，每个溶液平行进样两次，计算峰面积平均值。采用外标法定量。
7.4 空白试液测定
对空白试液（6.4）按照7.1的步骤等体积进样进行测定。
8结果计算
8.1水基食品模拟物中各种邻苯二甲酸酯类增塑剂含量的计算
水基食品模拟物中各种邻苯二甲酸酯类增塑剂的含量可由计算机工作站外标法直接计算，也可由式（1）计算：
式中：
Xi——食品模拟物中每种邻苯二甲酸酯类增塑剂的含量，单位为毫克每升（mg/L）；
Ai——样液中每种邻苯二甲酸酯类增塑剂的峰面积；
Ai0——空白试液中每种邻苯二甲酸酯类增塑剂的峰面积；
ci——标准工作溶液中每种邻苯二甲酸酯类增塑剂的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；
Asi——标准工作溶液中每种邻苯二甲酸酯类增塑剂的峰面积。
8.2橄榄油食品模拟物中各种邻苯二甲酸酯类增塑剂含量的计算
橄榄油食品模拟物中各种邻苯二甲酸酯类增塑剂的含量可由计算机工作站直接计算，也可由式（2）计算：
式中：
Xi——食品模拟物中每种邻苯二甲酸酯类增塑剂的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
Ai——试液中每种邻苯二甲酸酯类增塑剂的峰面积；
Ai0——空白液中每种邻苯二甲酸酯类增塑剂的峰面积；
ci——标准工作溶液中每种邻苯二甲酸酯类增塑剂的浓度，单位为毫克每千克（mg/kg）；
m2——配制橄榄油标准工作溶液时称取橄榄油食品模拟物的质量，单位为克（g）；
Asi——标准工作溶液中每种邻苯二甲酸酯类增塑剂的峰面积；
m——称取待测样品橄榄油食品模拟物的质量，单位为克（g）。
计算结果以各种邻苯二甲酸酯类增塑剂的平行测定值的算术平均值表示，当计算结果大于或等于1时，保留三位有效数字，当计算结果小于1时，保留至小数点后两位。
9测定低限
本方法水性食品模拟物的测定低限邻苯二甲酸二烯丙酯（DAP）为0.001mg/L，其他19种邻苯二甲酯均为0.01mg/L；橄榄油食品模拟物的测定低限邻苯二甲酸二烯丙酯（DAP）为0.001mg/kg，其他19种邻苯二甲酯均为0.01 mg/kg。
10 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。
11 再现性
不同的实验室，由不同操作者使用不同的设备，按相同的测试方法，对同一被测对象进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的15%。
