中华人民共和国国家标准
GB 23200.16-2016
代替NY/T 1016-2006
食品安全国家标准
水果和蔬菜中乙烯利残留量的测定
气相色谱法
National food safety standards-
Determination of ethephon residue in fruits and vegetables
Gas chromatography
前 言
本标准代替NY/T 1016-2006《蔬菜中乙烯利残留量的测定 气相色谱法》。
本标准与GB/T 5009.7-2008 相比主要修改如下：
——根据食品安全标准的格式进行了修改；
——规范性引用文件中增加GB 2763《食品中农药最大残留限量》标准；
——在试样制备中增加了取样部位的规定及细化了试样制备的要求；
——增加了精密度要求。
1 范围
本标准规定了水果和蔬菜中乙烯利残留量的测定方法。
本标准适用于水果、蔬菜中乙烯利残留量的分析。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的应用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
用甲醇提取样品中乙烯利，经重氮甲烷衍生成二甲基乙烯利后，用带火焰光度检测器（磷滤光片）的气相色谱仪测定，外标法定量。
4 试剂和材料
除非另有说明，在分析中仅使用色谱纯的试剂，水为GB/T 6682规定的一级水。
4.1 试剂
4.1.1氢氧化钾（KOH）。
4.1.2盐酸(HCl)。
4.1.3甲醇(CH3OH)。
4.1.4无水乙醚(C2H6O)。
4.2 溶液配制
甲醇-盐酸溶液（90+10）：量取90mL甲醇加到10mL盐酸中，混匀。
4.3 标准品
乙烯利标准品，纯度≥95％。
4.4 标准溶液配制
4.4.1乙烯利标准溶液：准确称取适量的乙烯利标准品，用甲醇配制成质量浓度为1000 mg/L的标准储备液。根据需要再用甲醇稀释标准储备液以制备适当浓度的标准工作液，配制过程需用聚乙烯器皿。
4.4.2 重氮甲烷溶液：制备见附录A。
5 仪器
5.1 气相色谱仪并配有火焰光度检测器。
5.2 超声波清洗器。
5.3 组织捣碎机。
5.4 氮气吹干仪。
6 分析步骤
6.1 试样制备
将蔬菜、水果样品取样部位按GB 2763附录A规定取样，对于个体较小的样品，取样后全部处理；对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块后处理；对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不同部位切取小片或截成小段或处理；取后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆，放入聚乙烯瓶中于-16 ℃~ -20 ℃条件下保存。
6.2 提取
称取试样10 g（精确至0.01g）于聚乙烯烧杯中，加入0.5 mL甲醇-盐酸溶液和50 mL甲醇，超声震荡提取5min，过滤于100 mL的聚乙烯容量瓶中，残渣再用30 mL甲醇提取一次，合并提取液聚乙烯容量瓶中，定容100 mL。
6.3 衍生化
准确吸取10 mL上述定容溶液放入15 mL聚乙烯离心管中，在干燥氮气流下于30℃～35℃水浴上浓缩至约1.5 mL，加入0.5 mL甲醇-盐酸溶液和8 mL无水乙醚，充分混合，放置 10 min，将上清液移入另一聚乙烯离心管中，残留液用1 mL无水乙醚萃取2次，萃取液并入上述清液中，于30℃~35℃水浴下浓缩至约1 mL。在通风柜内，向浓缩液里滴加重氮甲烷溶液，直至黄色不褪为止。盖严塞子，放置15 min。在氮气流下30℃～35℃水浴上浓缩至约1 mL，用乙醚稀释到2.00 mL，供气相色谱测定。
6.4 标准溶液的衍生化
取适量的乙烯利标准工作液（用甲醇定容10.0 mL），按照样品的提取和衍生步骤（5.2和5.3）进行操作。
6.5 气相色谱参考条件
色谱柱：FFAP 30 m×0.32 mm(id) ×0.25μm 弹性石英毛细管柱或相当极性的色谱柱。
载气：氮气，流量2.5 mL/min,纯度≥99.999%；
燃气：氢气，流量 85 mL/min，纯度≥99.999%；
助燃气：空气，流量 110 mL/min。
进样口温度：240℃；
升温程序：120℃（1min）40℃/min230℃（2min）；
检测器温度150℃。
检测器：火焰光度检测器（磷滤光片）。
进样量：1μL。
6.6 色谱分析
分别吸取标准样品和待测样品衍生化后的溶液（5.3和5.4）各1μL，分别注入色谱仪中，通过待测样品与标准样品衍生化物的峰面积比较，用外标法定量。
6.7 空白试验
除不待测样品外，均按上述步骤（5.2和5.3）进行操作。
7 结果计算
用色谱数据处理机或按式（1）计算样品中的乙烯利的残留量
式中：
ω——样品中乙烯利残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
A——样品溶液中二甲基乙烯利的色谱面积；
As——标准溶液中二甲基乙烯利的色谱峰面积；
ρ——标准溶液中乙烯利的质量浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；
V——提取溶剂定容体积，单位为毫升（mL）；
V1——分取体积，单位为毫升（mL）；
V2——上机液定容体积，单位为毫升（mL）；
m——称取样品的质量，单位为（克）。
计算结果应扣除空白值，计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保留两位有效数字。
8 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录B 的要求。
在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录C 的要求。
9 定量限
本标准方法的定量限为0.03 mg/kg 。
10 色谱参考图
浓度为0.05 mg/L的乙烯利的色谱图见图1。
