1. 为了尽可能延长ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色谱柱的使用寿命,请密切关注以下方面
●水的品质(包括水纯化系统)
●溶剂品质
●流动相的制备、储存和使用期限
●样品、缓冲盐和流动相的溶解性
●样品质量及其前处理
2. 出现问题时,往往只需要纠正一个不当的操作。
3. 请务必记住:
●使用在线过滤器装置,或者优选VanGuard保护柱
●尽可能避免使用100%水相流动相,以阻止细菌滋生
●每24~48小时更换一次水相流动相(如果必须使用100%水相流动相)
●每24~48小时需将旧的100%水相流动相丢弃以阻止细菌滋生
●每次向流动相A添加5%~10%有机溶剂,以调节梯度曲线
●用0.2μm滤膜过滤流动相的水相部分
●维护水纯化系统,使其保持良好的工作状态。
●尽可能只使用超纯水(18 MΩ•cm)和优质溶剂。使用HPLC级水,而不是UPLC级水。
●考虑样品前处理(如固相萃取、过滤等)。
4. 避免事项(在可能的情况下):
●100%水相流动相(如果可能)
●HPLC级瓶装水
●“直接加装"流动相
●使用旧置的水相流动相。切记每24~48小时彻底冲洗流动相储液瓶,并制备新鲜流动相
●磷酸盐缓冲液与高浓度乙腈(如 > 70%)一起使用,可能会出现沉淀
5. 请勿在观察到背压过高或峰分裂时便认定是由于色谱柱失效所引起:
●调查色谱柱出现故障的原因
●柱压
●流动相是否长菌、沉淀析出和/或样品的问题
●峰分叉
●样品质量
●进样溶剂的强度
6. 请牢记:通常UPLC流速较低,因此流动相消耗会慢很多(请仅制备所需的流动相或将多余的流动相冷藏保存)。
7. 流动相相关问题:
●是否在使用100%水相流动相?能否在流动相A中加入少量有机溶剂?
●是否要使用0.2 m滤膜过滤水相流动相?
●流动相配了多久?是否需要在储液瓶上注明制备日期?
●每24~48小时需添加流动相还是制备新鲜流动相?
●水的质量如何?水的质量最近有变化吗?水纯化系统是如何工作的?上一次维护是什么时候?
●是否在使用pH 7的磷酸盐缓冲液(在此条件下非常容易滋生细菌)?
8. 样品相关问题:
如果以流动相配制的纯标准品进样,是否会出现这些问题?
●如果按照样品前处理方法(如SPE、过滤等)用水
●制备标准品,是否仍会出现这些问题?
●样品是否随时间发生了变化?