GB 23200.76-2016 食品安全国家标准
食品中氟苯虫酰胺残留量的测定
液相色谱-质谱_质谱法
前 言
本标准代替SN/T 2581-2010 《进出口食品中氟虫酰胺残留量的测定 液相色谱—质谱/质谱法》。
本标准与SN/T 2581-2010相比，主要变化如下：
—标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；
—标准名称中“进出口食品"改为“食品"；
—标准范围中增加“其它食品可参照执行"。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：
—SN/T 2581-2010。
1 范围
本标准规定了食品中氟苯虫酰胺残留量测定的液相色谱-质谱/质谱分析方法。
本标准适用于葱、萝卜、西红柿、橙、大豆、苹果、茶、核桃、鱼、猪瘦肉、猪肝和牛奶中氟苯虫酰胺残留量的检测和确证，其它食品可参照执行。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不ke少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改dan）适用于本文件。
GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留xian量
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
试样中的氟苯虫酰胺残留用乙腈提取，提取液经石墨碳-氨基固相萃取柱或弗罗里硅土固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。
4 试剂和材料
所有试剂除特殊注明外，均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
4.1 试剂
4.1.1 乙腈（C2H3N）：色谱纯。
4.1.2 甲苯（C7H8）：色谱纯。
4.1.3 正己烷（C6H14）：色谱纯。
4.1.4 丙酮（C3H6O）：色谱纯。
4.1.5 氯化钠（NaCl）。
4.1.6 无水硫酸钠（Na2SO4）：650℃灼烧4 h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。
4.2 溶液配制
4.2.1 乙腈饱和正己烷：250 mL的分液漏斗中加入150 ml正己烷和50 mL乙腈混匀震荡5 min，取上层备用。
4.2.2 乙腈-甲苯（3+1，V/V）：用量筒量取350 mL乙腈和150 mL甲苯混匀备用。
4.2.3 丙酮-正己烷（1+1，V/V）：用量筒量取200 mL正己烷和200 mL丙酮混匀备用。
4.2.4 乙腈-水（7+3，V/V）：用量筒量取350 mL乙腈和150 mL水混匀备用。
4.3 标准品
4.3.1 氟苯虫酰胺（Flubendiamide）标准品：纯度大于等于99%，CAS号：272451-65-7，分子式：C23H22F7IN2O4S，分子量为682.39。
4.4 标准溶液配制
4.4.1 氟苯虫酰胺标准储备溶液(100 μg/mL)：准确称取适量的氟苯虫酰胺标准物质，用乙腈配成浓度为100 g/mL的标准储备液，该标准储备液置于4℃冰箱中避光密封保存。
4.4.2 氟苯虫酰胺基质标准工作液：使用前根据需要将标准储备溶液用各种样本的空白基质稀释成适当浓度的标准工作液。基质标准工作液应现用现配。
4.5 材料
4.5.1 石墨碳-氨基固相萃取柱：500 mg/500 mg，5 mL或相当者。加样前先用5 mL乙腈-甲苯预淋洗柱。
4.5.2 弗罗里硅土固相萃取柱：1000 mg，5 mL或相当者。加样前依次用2 mL丙酮和4 mL正己烷预淋洗柱。
4.5.3 微孔滤膜：0.2μm，通用型。
5 仪器和设备
5.1 液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。
5.2 分析天平：感量0.01 g和0.0001 g。
5.3 组织捣碎机。
5.4 均质器：10000 r/min。
5.5 离心机：4000 r/min。
5.6 聚四氟乙烯塑料离心管：50 mL，具塞。
5.7 旋转蒸发仪。
5.8 氮吹仪。
6 试样制备和保存
6.1 试样制备
6.1.1 茶叶、大豆、核桃
取代表性样品约500 g，经组织捣碎机粉碎并通过2.0 mm圆孔筛，混匀，装入洁净容器内密封，标明标记。
6.1.2 葱、萝卜、西红柿、橙、苹果、鱼、猪瘦肉、猪肝
取代表性样品约500 g，切碎，经组织捣碎机充分捣碎均匀，装入洁净容器内密封，标明标记。
6.1.3 牛奶
取代表性样品约500 g，装入洁净容器内密封，标明标记。
注：以上样品取样部位按GB 2763附录A执行。
6.2 试样保存
茶叶、粮谷、坚果类等试样于0℃～4℃保存；蔬菜、水果、畜、禽类等试样于-18℃冷冻保存。在制样过程中，应防止样品受到污染或发生氟苯虫酰胺残留量的变化。
7 分析步骤
7.1 提取
7.1.1 葱、萝卜、西红柿、橙、大豆、苹果、茶、核桃
大豆、核桃和茶叶：称取2 g（精确至0.01 g）试样于50 mL离心管中，加5 mL水放置0.5 h；葱、萝卜、西红柿、橙、苹果：称取2 g（精确至0.01 g）试样于50 mL离心管中。加入20 mL乙腈，以10000 r/min均质1 min，加入2 g氯化钠，摇匀，并于4000 r/min离心3 min。吸取上层有机相于浓缩瓶中，残渣中加入15 mL乙腈，重复提取一次，合并上层有机相，在40℃水浴中减压浓缩至近干，待净化。
7.1.2 鱼、猪瘦肉、猪肝、牛奶
称取粉碎后试样2 g（精确至0.01 g）于50 mL离心管中，加入2 g无水硫酸钠，20 mL乙腈和10 mL乙腈饱和正己烷，以10000 r/min均质1 min，以4000 r/min离心3 min，吸取下层有机相于浓缩瓶中，残渣中加入15 mL乙腈，重复提取一次，合并下层有机相，在40℃水浴中减压浓缩至近干，待净化。
7.2 净化
7.2.1 葱、萝卜、西红柿、橙、大豆、苹果、茶叶、核桃
以3×2 mL乙腈-甲苯洗涤浓缩瓶中残留物并全部转入石墨碳-氨基固相萃取柱中，然后用15 mL乙腈-甲苯淋洗柱子，控制流速不超过2.0 mL/min，收集全部流出液，于40℃水浴中减压浓缩，氮吹至近干，用乙腈-水溶解残渣并定容至2.0 mL，过滤膜，供分析。
7.2.2 鱼、猪瘦肉、猪肝、牛奶
以3×2 mL正己烷洗涤浓缩瓶中残留物并全部转入弗罗里硅土固相萃取柱中，待溶液全部流出固相萃取柱后加入2 mL正己烷淋洗，弃去全部流出液。再以10 mL 丙酮-正己烷洗脱，控制流速不超过2.0 mL/min，收集全部洗脱液，于40℃水浴中减压浓缩，氮吹至近干，用乙腈-水溶解残渣并定容至2.0 mL，过滤膜，供分析。
7.3 测定
7.3.1 液相色谱-质谱/质谱参考条件
a) 色谱柱：C18 柱，2.1 50 mm，1.7 m 或相当者；
b) 流动相以及梯度洗脱程序：见表1。
表1 流动相梯度洗脱程序
c) 流速：0.20 mL/min；
d) 柱温：35℃；
e) 进样量：2 L；
f) 质谱条件参见附录B。
7.3.2 色谱测定与确证
根据样液中氟苯虫酰胺含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中氟苯虫酰胺响应值均应在仪器检测线性范围内。如果残留量超出标准曲线范围，应用乙腈将样品提取液（7.1）进行适当稀释。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，氟苯虫酰胺的保留时间约为1.75 min。
被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同实验条件下，如果样品中待检测物质与标准溶液中对应的保留时间偏差在±2.5 %之内；且样品谱图中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表2规定的范围，被确证的样品可判定为氟苯虫酰胺阳性检出。标准品的质谱图参见附录A中图A.1、A.2。
表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
7.4 空白实验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。
8 结果计算和表述
用色谱数据处理机或按（1）式计算试样中氟苯虫酰胺的残留含量，计算结果需扣除空白值。
式中：
X—试样中氟苯虫酰胺的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
A—样液中氟苯虫酰胺的峰面积或峰高；
AS—标准工作液中氟苯虫酰胺的峰面积或峰高；
c—标准工作液中氟苯虫酰胺的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
m—最终样液所代表的试样质量，单位为克（g）；
V—样液最终定容体积，单位为毫升（mL）。
注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。
9 精密度
9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D的要求。
9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录E的要求。
10 定量限和回收率
10.1 定量限
本方法氟苯虫酰胺的定量限为0.005 mg/kg。
10.2 回收率
氟苯虫酰胺的添加回收率参见附录C。
