正确使用凝胶渗透色谱柱才能得到想要的效果

更新时间:2022-11-21      点击次数:401
  凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布,同时根据所用凝胶填料不同,可分离脂溶性和水溶性物质,分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。近年来,凝胶色谱也广泛用于小分子化合物。相对分子质量相近而化学结构不同的物质,不可能通过凝胶渗透色谱法达到分离纯化的目的。凝胶色谱不能分辨分子大小相近的化合物,相对分子质量相差需在10%以上才能得到分离。
  凝胶渗透色谱是一个复杂的体系,需要考虑的问题很多。在这里我就凝胶渗透色谱柱使用分享给大家一些经验:
  色谱柱的安装和使用
  1.在连接色谱柱之前,预先用即将使用的流动相体系置换以前用的流动相体系。
  2.在连接色谱柱时,要赶走因色谱柱保存不当或长时间不用在色谱柱的进口或者出口处产生的一些气泡。
  3.连接色谱柱要注意标示的色谱柱进出口方向。
  4.如果分析所用的温度较高,应在较低的流速下比如0.2到0.3ml/min的流速下缓慢地升高温度,当温度达到设定温度后,再慢慢地增大流速至设定值。
  5.如果色谱柱需要较长的时间才能平衡稳定,检查色谱柱连接处是否有漏液。
  凝胶渗透色谱柱的拆除和保存
  1.完成实验分析后,在0.2ml/min的流速下,缓慢将柱温箱温度降到室温。
  2.色谱柱降至室温后,要快速地用堵头将仪器上拆下的色谱柱密封好,避免柱子里面的流动相溢出。
  3.将色谱柱放入到厂家提供的包装盒中,放置在温度变化很少的室内,恒温是理想选择。
  4.凝胶渗透色谱柱柱子如长期不用,最好隔一段时间在仪器上冲洗一下,以确保柱子内的流动相不会挥发殆尽。
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