出口植物源性食品中克百威及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法SN/T 0337-2019

更新时间:2023-04-10      点击次数:237

SN_T 0337-2019 出口植物源性食品中<span class=

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 0337-2019

代替SN/T 0037-1995

出口植物源性食品中克百威及其代谢物残留量的测定

液相色谱-质谱/质谱法

 

本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。

本标准代替SN 0337-95《出口水果和蔬菜中克百残留量检验方法》。

本标准与SN 0337-95 相比,主要技术性变化如下:

——标准名称由《出口水果和蔬菜中克百残留量检验方法》修改为《出口植物源性食品中克百及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法》;

——增加了克百代谢物3-羟基克百的检测;

——扩大了标准检测的适用范围;

——删减了抽样部分;

——改进了样品前处理技术;

——仪器方法由气相色谱法变更为液相色谱-质谱/质谱法。

——降低了定量限,针对不同样品基质给出了克百及其代谢物的添加回收率范围。

请注意本文件的某些内容可能涉及专li。本文件的发布机构不承担识别这些专li的责任。

本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。

本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院。

本标准主要起草人:李晓娟、吴玉平、张洋、施鹏斐、王超、李淑娟。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为:

——SN 0337-1995

 

1 范围

本标准规定了出口植物源性食品中克百及其代谢物3-羟基克百残留量的测定方法。

本标准适用于大米、小麦、大豆、花生、洋葱、油菜、菠菜、番茄、黄瓜、马铃薯、橙子、苹果、香蕉和茶叶中克百及其代谢物3-羟基克百残留量的检测和确证。

 

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不ke少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 2763-2016 食品安全国家标准 食品中农药最大残留量

GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法

 

3 原理

试样加酸化乙腈振荡提取,经QuEChERS方法对提取液进行净化,采用液相色谱-质谱/质谱法测定,外标法定量。

 

4 试剂和材料

除非另有说明,所有试剂均为分析纯,水为GB/T 6682 规定的一级水。

4.1 乙腈: 色谱纯。

4.2 甲酸:色谱纯。

4.3 乙酸。

4.4 氯化钠。

4.5 无水硫酸镁。

4.6 乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶(PSA):40μm60μm

4.7 十八烷基硅烷键合硅胶(C18):40μm60μm

4.8 石墨化炭黑(GCB):40μm120μm

4.9 0.5% 乙酸-乙腈溶液:准确量取2.5 mL 乙酸于500 mL 容量瓶中,加入乙腈(4.1)定容,混匀。

4.10 0.5% 甲酸溶液:准确量取2.5 mL 甲酸于500 mL 容量瓶中,加入一级水定容,混匀。

4.11 0.1% 甲酸溶液:准确量取0.5 mL 甲酸于500 mL 容量瓶中,加入一级水定容,混匀。

4.12 乙腈-水溶液(30+70, 体积比):取30 mL 乙腈(4.1)和70 mL 一级水混合均匀。

4.13 0.1% 甲酸-乙腈溶液:准确量取0.5 mL 甲酸于500 mL 容量瓶中,加入乙腈(4.2)定容,混匀。

4.14 克百标准物质: C12H15NO3CAS 号:1563-66-2,纯度大于等于90%

4.15 3-羟基克百标准品:C12H15NO4 CAS 号:16655-82-6,纯度大于等于90%

4.16 克百标准储备液:准确称取 10 mg(精确至0.1mg)克百标准品于10 mL容量瓶中,用乙腈(4.2)溶解并定容,配制成浓度约为1 mg/mL 的标准储备液,于04冰箱内避光保存。

4.17 3-羟基克百标准储备液:准确称取 10 mg(精确至0.1mg)克百标准品于10 mL容量瓶中,用乙腈(4.1)溶解并定容,配制成浓度约为1 mg/mL的标准储备液,于04冰箱内避光保存。

4.18 克百标准中间液:准确吸取适当体积的克百标准储备液,用乙腈(4.1)配制成浓度为10.0mg/L 的标准中间液,于0℃~4℃冰箱内避光保存。

4.19 3-羟基克百标准中间液:准确吸取适当体积的3-羟基克百标准储备液,用乙腈(4.1)配制成浓度为10.0 mg/L 的标准中间液,于0℃~4℃冰箱内避光保存。

4.20 克百3-羟基克百混合标准工作液:取适量的克百标准中间液(4.18)和3-羟基克百4.19)标准中间液,用乙腈- 水溶液(4.12)配制成标准工作液,该工作液需现用现配。

 

5 仪器设备

5.1 液相色谱-质谱/质谱仪:配有电喷雾离子源(ESI)。

5.2 电子天平:感量0.01 mg 0.01 g

5.3 振荡器。

5.4 旋涡混合器。

5.5 离心机:最高转速不低于10 000 r/min

5.6 氮吹浓缩仪。

5.7 高速离心管:规格为50 mL 5 mL

 

6 试样制备与保存

6.1 试样制备

粮谷、油料及茶叶类样品:取代表性样品约500 g , 用粉碎机全部粉碎并通过20 目筛;水果及蔬菜类样品:取代表性样品约500 g,用匀浆机或组织捣碎机均质。样品制备后分别装入洁净的盛样瓶内,密封并标明标记。

6.2 试样保存

粮谷、油料及茶叶类试样于0℃~4℃保存;水果及蔬菜类试样于-18℃以下冷冻保存。在抽样及制样的过程中,应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

 

7 测定步骤

7.1 提取

7.1.1 蔬菜和水果类:称取5 g 试样(精确至0.01 g)于50 mL 离心管中,加入10 mL 0.5% 乙酸-乙腈溶液(4.9),涡旋混匀后振荡提取30 min,加入约2 g 氯化钠和约2 g 无水硫酸镁,涡旋混匀,20 000 r/min条件下离心3 min,取上清液待净化。

7.1.2 粮谷、油料类和茶叶类:称取2 g 试样(精确至0.01 g)于50 mL 离心管中,加入5 mL0.5% 乙酸溶液(4.10),涡旋混匀静置30min,加入10 mL 0.5% 乙酸- 乙腈溶液(4.9),涡旋混匀后振荡提取30 min,加入约2 g 氯化钠和约2 g 无水硫酸镁,涡旋混匀,于10 000 r/min 条件下离心3 min,取上清液待净化。

7.2 净化

准确称取250 mg 无水硫酸镁、100 mg PSA100 mg C18 50 mg GCB 净化材料加入5 mL 高速离心管中。准确移取2mL上清液(7.1)加入5mL 高速离心管中,涡旋混匀,于10000r/min 离心3 min,取1 mL 上清液置于玻璃管中,于40℃下氮气吹至近干,再加入1.0 mL 乙腈-水溶液(4.12)充分溶解定容,过0.2μm 尼龙滤膜,待LC-MS/MS测定。

7.3 液相色谱- 质谱/ 质谱测定

7.3.1 液相色谱条件

7.3.1.1 色谱柱:C18100mm×2.1 mm×1.7μm,或性能相当者。

7.3.1.2 柱温:45℃。

7.3.1.3 进样量:5μL

7.3.1.4 流动相及梯度洗脱条件见表1

image.png

7.3.2 质谱条件

仪器质谱条件参见附录A

7.3.3 定性测定

按照7.3.1 的条件测定标准溶液及样液,如果样液与标准溶液质量色谱峰保留时间相差不超过±2.5%,在扣除背景后的质谱图中,所选择的监测离子全部出现,且定性离子的相对丰度(用相对于zui强离子丰度的强度百分比表示)与浓度相当的标准工作溶液的相对丰度一致,相对丰度允许偏差不超过表2 规定的范围,则可判断样品中存在对应的被测物。

image.png

7.3.4 定量测定

7.3.1仪器最佳工作状态下,对标准工作溶液进样,以待测物色谱峰峰面积为纵坐标,标准工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线,用标准工作曲线对样品进行定量,样品溶液中待测物的响应值应在仪器测定的线性范围内;如果超出线性范围,应进行适当稀释后进样测定。在上述色谱条件下,克百3-羟基克百的保留时间分别约为2.2 min 1.9 min,克百3-羟基克百标准品的选择离子色谱图参见附录B 中的图B.1 和图B.2

7.4 空白试验

除不加试样外,均按上述7.1 7.3 步骤进行。

 

8 结果计算和表述

液相色谱-质谱/质谱测定采用标准曲线法定量,按式(1)分别计算试样中克百3-羟基克百的残留量:

image.png

式中:

X ——试样中克百3-羟基克百残留量,单位为毫克每千克(mg/kg);

c ——从标准工作曲线得到的试样溶液中被测组分的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);

f ——稀释倍数;

V ——样液最终定容体积,单位为毫升(mL);

m ——试样的质量,单位为为克(g)

计算结果应扣除空白值。

克百GB 2763-2016 中定义的残留物为克百3-羟基克百之和,以克百表示。因此按式(2)计算试样中克百的总残留量:

image.png

式中:

X——试样中以克百表示的总残留量,单位为毫克每千克(mg/kg);

X克百——试样中克百的残留量,单位为毫克每千克(mg/kg);

X3-羟基克百——试样中3-羟基克百的残留量,单位为毫克每千克(mg/kg);

0.93——3-羟基克百换算为克百的系数。

 

9 定量限与回收率

9.1 定量限

液相色谱-质谱/质谱检测方法对大米、小麦、大豆、花生、洋葱、油菜、菠菜、番茄、黄瓜、马铃薯、橙子、苹果、香蕉和茶叶中克百3-羟基克百的定量限均为0.005 mg/kg

9.2 添加浓度和回收率

回收率数据参见附录C

 

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