中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1434-2007
蔬菜中2,4-D等13种除草剂多残留的测定
液相色谱质谱法
前言
本标准的附录A、附录B和附录C为资料性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。
本标准起草单位：农业部稻米及制品质量监督检验测试中心、中国水稻研究所、浙江大地农作物产品质量安全检测中心。
本标准主要起草人：牟仁祥、陈铭学、章林平、陈能、朱智伟。
1范围
本标准规定了用液相色谱质谱法测定蔬菜中2,4-D等13种除草剂多残留(参见附录A)的方法。
本标准适用于蔬菜中2,4-D等13种除草剂残留量的测定。
本标准方法检出限为0.0004mg/kg~0.01mg/kg(参见附录A)。
2原理
试样经乙腈匀浆提取，提取液在酸性条件下经盐析，乙二胺基-N-丙基(PSA)分散固相萃取净化后，用液相色谱质谱仪检测。根据选择离子丰度比和保留时间定性，外标法定量。
3试剂和材料
除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和去离子水或相当纯度的水。
3.1乙腈：色谱纯。
3.2 甲醇：色谱纯。
3.3 1.0mol/L盐酸溶液。吸取8.4mL盐酸加入50mL水中，稀释至100mL。
3.4 氯化钠：140℃烘烤4 h，在干燥器内冷却至室温，贮于干燥器中备用。
3.5乙酸铵。
3.6流动相A液：准确称取0.385g乙酸铵，溶解在1000mL甲醇中，过0.22μm滤膜。
3.7流动相B液：准确称取0.385g乙酸铵，溶解在1000mL水中，过0.22μm滤膜。
3.8乙二胺基-N-丙基(PSA) ：40μm，6.0nm。
3.9农药标准品：纯度≥95%。
3.10农药标准溶液。
单一农药标准溶液：分别准确称取某农药标准品，用乙腈溶解稀释，逐一配成1 000 mg/L的单一农药标准储备溶液，-18℃以下贮存。使用时根据各农药在质谱中的响应值，吸取适量的标准储备液，用甲醇稀释配制成所需的标准工作溶液。
混和农药标准溶液：根据各农药在质谱中的响应值，逐一吸取一定体积的农药标准储备液分别注入同一容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制成农药混和标准储备溶液。使用前用甲醇稀释成所需的标准工作液。混合标准工作溶液质量浓度见附录A。
4仪器
4.1液相色 谱质谱仪：附电喷雾离子源(ESI)。
4.2高速分散机：转速不低于20000r/min。
4.3离心机。
4.4氮吹仪。
5试样的制备
将采集的样品去除其中杂物，取可食部分，切碎混匀后密封，于4℃冷藏保存。
6分析步骤
6.1样品处理
6.1.1提取
称取15g试样(精确到0.01g)于100mL离心管中，加入30.0mL乙腈，在高速分散机中高速匀浆2min。将离心管放入离心机，以4 000 r/min离心5 min，取上清液10 mL，加入1.0 mL盐酸溶液(3.3)，振摇。加入2.5g氯化钠，振摇，静置10min。
6.1.2净化
取上述1mL上层提取液于2 mL离心管中，加入50 mg PSA，放入离心机中，以7000 r/min离心5min。取0.5mL于50℃用氮气缓慢吹干后，加入0.5mL甲醇，过0.22μm滤膜，用于液相色谱质谱测定。
6.2 测定
6.2.1仪器参考条件
a.色谱柱：C18柱，3.0μm，150mm×2.1mm；
b.柱温：40℃；
c.进样量：10μL；
d.离子源：电喷雾ESI；
e.扫描方式：多信号扫描；
f.雾化气、窗帘气均为高纯氮气；使用前应根据仪器状况调节各气体流量，以使质谱灵敏度达到要求；
g.离子源温度：350℃；
h.电喷雾电压：3000V；
i.监测定性定量离子对、碰撞电压参见附录B；
j.流动相及流速见表1。
6.2.2定性和定量测定
样品中未知组分的色谱保留时间与标准品一致，且相应的定性离子和定量离子的丰度比同标准相一致则可认定为该农药。
采用外标法单离子定量，各农药的定量离子参见附录B。
7结果计算
样品中被测农药残留量以质量分数W计，数值以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式(1)计算：
式中：
c一一从标准曲线上得到的被测组分溶液质量浓度，单位为毫克每升(mg/L)；
V一一样品提取时加入乙腈的体积，单位为毫升(mL)；
m一一试样质量的数值，单位为克(g)。
计算结果精确到二位有效数字。样品含量超过1mg/kg时精确到三位有效数字。
8精密度
按照GB/T 6379.2-2004的规定，对2,4-D等13种除草剂在3种蔬菜上添加0.10mg/kg、0.20
mg/kg和0.40mg/kg三个浓度水平进行实验室间的方法的精密度试验，重复性限在0.0017mg/kg~0.0900mg/kg之间，再现性限在0.0036mg/kg~0.1948mg/kg之间。
9标样选择离子监测图
参见附录C。
