中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 0192-2017
代替SN 0192-1993
出口水果中溴螨酯残留量的检测方法
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准代替SN 0192-1993《出口水果中溴螨酯残留量检验方法》。
与SN 0192-1993相比，除编辑性修改外，主要技术修改如下：
——增加了样品基质；
——修改了样品提取步骤；
——修改了样品净化步骤；
——将样品测定填充色谱柱改成毛细管色谱柱；
——增加了气相色谱质谱确证法；
——略去了抽样步骤。
请注意本文件的某些内容可能涉及专li。本文件的发布机构不承担识别这些专li的责任。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：时逸吟、杨惠琴、程甲、樊彦莉、周瑶、伊雄海、邓晓军、朱坚。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：
——SN 0192-1993。
1范围
本标准规定了水果中溴螨酯残留量的检测和确证方法。
本标准适用于苹果、樱桃、柠檬、草莓、菠萝、葡萄、西瓜中溴螨酯残留量的检测和确证。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不ke少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
试样中残留的溴螨酯用乙腈匀浆提取，盐析离心后，上清液经固相萃取柱净化，用带有电子捕获检测器气相色谱测定，外标法定量，如有必要用气相色谱质谱联用仪进行确证。
4试剂材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯。
4.1 乙腈：色谱纯。
4.2 甲苯：色谱纯。
4.3 正己烷：色谱纯。
4.4 氯化钠。
4.5无水硫酸钠：用前在 650℃灼烧4 h，冷却后贮于干燥器中。
4.6乙腈-甲苯溶液（3+1，体积比）：取200 mL甲苯，加入600 mL乙腈，摇匀备用。
4.7溴螨酯（bromopropylate，C17 H16Br2O3，CAS号8181-80-1）标准品：纯度大于或等于98%。
4.8溴螨酯标准储备溶液：准确称取0.01g（精确至0.0001g）溴螨酯标准品于10mL的容量瓶中，用正己烷溶解配成浓度为1.0 mg/mL的标准储备溶液，于4℃保存，保存期限为3个月。
4.9溴螨酯标准中间溶液：准确移取 1 mL标准储备液至10 mL容量瓶中，用正己烷稀释至刻度配成浓度为100μg/mL的标准溶液，现配现用。
4.10基质标准工作溶液：将一定体积的溴螨酯标准溶液分别加到适量样品空白基质提取液中，混匀，配成基质标准工作溶液。基质标准工作溶液应现用现配。
4.11 石墨化炭-氨基固相萃取柱：石墨化炭和氨丙基填料各0.5 g，6 mL，或相当者。
4.12无水硫酸钠柱：7.5 cm×1.5 cm（i.d.）玻璃柱，内装5 cm高无水硫酸钠。
4.13有机相滤膜：0.45μm。
5仪器与设备
5.1气相色谱仪：配有电子捕获（ECD）检测器。
5.2 气相色谱-质谱联用仪：配有电子轰击源（EI）。
5.3天平：感量0.0001 g、0.01 g各一台。
5.4食品粉碎机。
5.5 均质器。
5.6 离心机：最大转速为4000r/min。
5.7 旋转蒸发仪。
5.8 固相萃取装置。
5.9 氮吹仪。
5.10 涡旋混匀器。
6试样的制备与保存
6.1试样制备
取有代表性样品约500g，将其可食部分切碎后，用组织捣碎机将样品加工成浆状，装入洁净容器作为试样，密封并标明标记。
6.2 试样保存
试样于-18℃状态下保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
7分析步骤
7.1 提取
称取试样10 g（精确至0.01 g）于50 ml.塑料离心管中，加入10 mL乙腈，高速均质1 min进行提取，4000 r/min离心5 min取上清液。残渣再加入10 mL乙睛重复提取一次。合并提取液，加入2 g氯化钠，振摇10min，4000r/min离心5min后，上清液过无水硫酸钠柱，后将提取液收集于圆底烧瓶中，在40℃以下旋转蒸发至近干，残留物中加入2 mI乙腈甲苯溶液容解待净化。
7.2净化
用10mL乙腈-甲苯混合溶液活化石墨化炭氨基固相萃取柱，弃去淋洗液。将上述的待净化液（7.1）转移至小柱中过柱，用6 mL乙腈-甲苯溶液分三次洗涤样液瓶，并将洗涤液移入柱中，收集全部流出液（在整个活化、上样和洗脱过程中应避免SPE柱干涸），过程中控制流速在1mL/min。收集洗脱液，于15mL刻度试管中并于40℃下氮吹浓缩至近干，准确加入1.0 mL正己烷溶液后供气相色谱或气相色谱-质谱仪测定。
7.3测定
7.3.1 气相色谱参考条件
色谱测定条件如下：
a） 色谱柱：DB-5石英毛细管柱，长30 m，内径0.32 mm，膜厚0.25μm，或相当者；
b） 进样口温度：280℃；
c） 进样量：1.0μL；不分流进样，0.6 min开阀；
d） 柱温：初始温度100℃，保持1 min，以10℃/min升温至230℃，保持5 min，再以30℃/mi升温至280℃，保持10 min；
e） 载气：氮气，纯度大于或等于99.999% ；恒流模式；流速：1.0 mL/min；
f） 检测器温度：300℃；
g） 尾吹气：氮气，60 mL/min。
7.3.2 气相色谱-质谱参考条件
7.3.2.1色谱测定条件如下：
a）色谱柱：DB-5MS石英毛细管柱，长30 m，内径0.25 mm，膜厚0.25μm，或相当者；
b）进样口温度：280℃；
c）进样量：1.0μL，不分流进样，0.6 min开阀；
d）柱温：初始温度100℃，保持1 min，以10℃/min升温至230℃，保持5 min，再以30℃/min升温至280℃，保持10 min；
e） 载气：氦气，纯度大于或等于9999% ；恒流模式；流速：1.0 mL/min。
7.3.2.2质谱测定条件如下：
a） GC-MS接口温度：280℃；
b） 电离方式：EI；
c） 离子源温度：150℃；
d） 溶剂延迟：10 min；
e） 测定方式：选择离子监测模式（SIM），详见表1。
表1 溴螨酯的监测离子及丰度比
名称 | 监测离子（m/z）amu | 监测离子丰度比% |
溴螨酯 | 341*、339、343、183、157 | 100：50：50：60：30 |
注：*表示定量离子 | ||
7.3.3气相色谱测定
7.3.3.1标准曲线：采用标准工作液，分别配制成0.00μg/mL、0.01μg/mL、0.05μg/mL、0.10g/mL、0.20μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL标准溶液，直接经气相色谱测定或配制成0.00μg/mL、0.01μg/mL、0.05μg/mL、0.10g/mL、0.20μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL标准基质工作溶液供气相色谱-质谱测定，峰面积对浓度作线性回归曲线，计算相关系数。
7.3.3.2根据样液中被测物含量情况，对标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定，以峰面积为纵坐标，标准工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量。标准工作液和样液中待测物的响应值均应在仪器检测的线性范围内。如果含量超过标准曲线范围，应稀释到适合浓度后分析，标准品的色谱图参见附录A。
7.3.4 气相色谱-质谱确证
根据样液中被测物含量情况，对标准基质工作溶液和样液等体积穿插进样测定，以峰面积为纵坐标，标准基质工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准基质工作曲线对样品进行定量。标准工作液和样液中待测物的响应值均应在仪器检测的线性范围内。如果含量超过标准曲线范围，应稀释到适合浓度后分析。在相同试验条件下，试样中待测物质的保留时间与标准工作溶液中对应的保留时间偏差在±2.5%之内；并且被测样品与标准品的质谱图相似，所选择的全部监测离子均出现且丰度比也相一致，其允许偏差不超过表2规定的范围时，则可确定为样品中存在这种药物残留。溴螨酯的选择离子监测总离子流图和全扫描质谱图参见附录B。
7.4空白试验
除不加试样外，均按上述操作步骤进行。
8结果计算和表述
用色谱处理软件中的外标法绘制标准曲线，试样中溴螨酯残留量分别按式（1）计算。计算结果需扣除空白值。
式中：
X——样品中溴螨酯残留量，单位为毫克每千克（ mg/kg）；
c——从标准曲线中得到溴螨酯标准工作溶液的浓度，单位为微克每毫升（ug/mL）；
V——样品定容体积，单位为毫升（mL）；
n——样品称样量，单位为克（g）。
9测定低限、回收率
9.1测定低限
气相色谱和气相色谱质谱法对溴螨酯残留量的测定低限均为：0.01mg/kg。
9.2回收率
详见表3和表4。
