NY/T 3943-2021 水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的测定

更新时间:2023-06-02      点击次数:247

NY_T 3943-2021 水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的测定 离子色谱法.jpg

中华人民共和国农业行业标准

NY/T 3943-2021

水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的测定

离子色谱法

Determination of glucose fructose sucrose and sorbitol in fruits

by ion chromatography method


前言

本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则第 1部分:标准化文件的结构和起草规则》和GB/T20001.4--2015《标准编制规则第4部分:试验方法标准》的规定起草。

请注意本文件某些内容可能涉及专(zhuan)利。本文件的发布机构不承担识别专(zhuan)利的责任。

本文件由农业农村部种植业管理司提出。

本文件由全国果品标准化技术委员会(SAC/TC 501)归口。

本文件起草单位:中国农业科学院果树研究所、青岛农业大学、青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室、山东农业工程学院。

本文件主要起草人:聂继云、匡立学、李静、张建一、高贯威、李银萍、李海飞、秦旭。


1范围

本文件规定了水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇测定的离子色谱法。

本文件适用于水果中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的含量测定。


2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可(ke)少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法


3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。


4原理

试样用甲醇提取,经固相萃取小柱净化,稀释,阴离子交换柱分离,脉冲安培检测器测定,保留时间定性,峰面积外标法定量。


5试剂或材料

除非另有说明,本方法所用试剂物为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。

5.1甲醇(CH4OCAS号:67-56-1):色谱纯。

5.2氢氧化钠溶液(NaOH50%,质量浓度):色谱纯。

5.3 200 mmol/L氢氧化钠溶液:准确量取10.4mL氢氧化钠溶液(5.2),用水定容至1000 mL

5.4葡萄糖(C6H12O6CAS号:50-99-7):纯度为99%或经国家认证并授予标准物征证书的标准物质。

5.5果糖(C6H12O6CAS号:57-48-7)纯度为99%全或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

5.6蔗糖(C12H12O6CAS号:57-50-1)纯度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

5.7山梨醇(C6H14O6CAS号:50-70-4)纯度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

5.8标准储备液(1.0 mg/ mL):分别称取葡萄糖(5.4)、果糖(5.5)、蔗糖(5.6)、山梨醇(5.7)各50 mg(精确至0.1mg)于450mL容量瓶中,用水溶解并定容,配制成1.0mg/mL的标准储备液。4℃下保存,有效期1个月。

5.9标准工作溶液:分别量取0.50 mL1.00 mL2.00 mL3. 00 mL4.00 mL5.00 mL葡萄糖、果糖、蔗糖标准储备液(5.8)和0.20 mL0.40 mL0.60 mL.0.80 mL1.00 mL1.20 ml山梨醇标准储备液(5.8)于6100mL容量瓶中,用水稀释至刻度,配置成4种糖组分的混合标准溶液,混合标准溶液中葡萄糖、果糖、蔗糖的浓度分别为5.0 mg/L10.0 mg/L20.0 mg/L30.0 mg/L40.0 mg/L50.0 mg/L,山梨醇的浓度分别为2.0 mg/L4.0 mg/L6.0 mg/L8.0 mg/L10.0 mg/L12.0 mg/L

5.10固相萃取小柱:反相C18固相萃取小柱,200 mg/6 mL,或性能相当者。


6仪器设备

6.1离子色谱仪 :脉冲安培检测器,Au工作电极。

6.2 电子天平:感量0.01 g0.1 mg

6.3冷冻研磨仪。

6.4超声波清洗机:频率不低于40 kHz

6.5离心机:转速不低于9 000 r/min

6.6固相萃取装置。


7试样的制备

取干净果实代表性的可食部分250 g,适当切分,液氮冷冻,研磨成粉末,-18℃以下储存备用。


8分析步骤

8.1试样溶液的制备

称取5 g(精确至0.01 g)均匀试样至50 mL离心管中,加入30 mL甲醇(5.1)混匀,40 kHz的频率下室温超声提取20min9000r/min离心15min,上清液转移至50mL容量瓶中,残渣再用10mL甲醇(5. 1)按上述步骤重复提取1次,合并2次提取液,用甲醇(5.1)定容至刻度,摇匀,得到样品提取液。吸取1.00mL样品提取液于50ml容量瓶中,用水定容至刻度。依次用5mL甲醇(5.1)和5mL水预淋洗、活化固相萃取小柱(5.10)。吸取5mL稀释后的样品提取液加入活化好的固相萃取小柱中过滤净化,弃去2mL.初始滤液,收集滤液供离子色谱分析测定。

8.2离子色谱参考条件

a)色谱柱:阴离子交换柱(PA10),250 mm×4.0 mm

b)柱温:30℃;

c)流动相:A 为水,B200 mmol/L氢氧化钠溶液(5.3);

d)流速:1 mL/ min

e)进样量:10μL

I)工作电极:Au电极;

g)参比电极:Ag/AgCl参比电极;

h 检测池温度:30℃;

i 洗脱条件按表1设置。

image.png

8.3标准工作曲线绘制

按照8.2设定的色谱工作条件,待仪器稳定后,依次测定系列标准工作溶液(5.9)中葡萄糖.果糖、蔗糖和山梨醇的色谱峰面积。以系列标准工作溶液(5.9)中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的浓度为横坐标,以相应峰面积为纵坐标,绘制葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的浓度色谱峰面积标准曲线,标准品色谱图见附录A

8.4试样溶液的测定

当试样溶液注入离子色谱仪中,得到峰面积。根据标准曲线得到待测液中葡萄糖、果糖、蔗糖和山梨醇的浓度。若试样溶液中测定组分浓度超过标准曲线上限,应稀释至标准曲线浓度范围后再行测定。

8.5 空白试验

除不加入试样外,采用完(wan)全相同的分析步骤进行测定。


9结果计算和表述

试样中葡萄糖、果糖、蔗糖或山梨醇的含量按公式(1)计算。

image.png

式中:

ω——试样中葡萄糖、果糖、蔗糖或山梨醇的含量的数值,单位为克每百克(g/100 g);

C——试样溶液中葡萄糖、果糖、蔗糖或山梨醇的浓度的数值,单位为毫克每升(mg/L);

C0——空白溶液中葡萄糖、果糖、蔗糖或山梨醇的浓度的数值,单位为毫克每升(mg/L);

V——提取液体积的数值,单位为毫升(mL);

f——试样溶液稀释倍数;

m——试样的质量的数值,单位为克(g);

10000——换算系数。

计算结果≥10.0 g/100 g时,保留3位有效数字;计算结果<10.0 g/100 g时,保留2位有效数字。


10 精密度

在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的15%

在再现性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的20%


11检出限和定量限

当称样量为5 g时,水果中山梨醇的检出限为0.015 g/100 g,葡萄糖、果糖、蔗糖的检出限均为0.0030 g/100 g;水果中山梨醇的定量限为0.050 g/100 g,葡萄糖、果糖、蔗糖的定量限均为0.010 g/100 g




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