GB 5009.26-2023 食品安全国家标准 食品中N-亚硝胺类化合物的测定 第二法

更新时间:2024-03-28      点击次数:133

GB 5009.26-2023 食品安全国家标准 食品中N-亚硝胺类化合物的测定.jpg

中华人民共和国国家标准

GB 5009.26-2023

食品安全国家标准 食品中N-亚硝胺类化合物的测定

 

前言

  本标准代替GB5009.26-2016《食品安全国家标准食品中N-亚硝胺类化合物的测定》。

  本标准与GB 5009.26-2016相比,主要变化如下:

  ——增加了第一法水蒸气蒸馏-气相色谱质谱/质谱法;

  ——增加了第二法QuEChERS气相色谱-质谱/质谱法;

  ——增加了第三法水蒸气蒸馏-液相色谱-质谱/质谱法;

  ——删除了气相色谱-质谱法;

  ——修改了原第二法气相色谱-热能分析仪法为第四法;

  ——修改了前处理蒸馏法条件、气相色谱热能分析仪法的检出限和定量限。

 

1范围

  本标准规定了食品中N-二甲基亚硝胺(NDMA)的测定方法。

  本标准适用于肉及肉制品、水产动物及其制品中N-二甲基亚硝胺的测定。



第二法QuEChERS-气相色谱质谱/质谱法

 

9原理

  本法以N-二甲基亚硝胺-D6为内标,试样中加入内标,试样中的N-二甲基亚硝胺经乙腈提取,基质分散萃取填料净化,采用气相色谱-质谱/质谱仪测定,内标法定量。

 

10试剂与材料

  除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水

10.1 试剂

10.1.1乙腈(C2H3N):色谱纯。

10.1.2硫酸镁(MgSO4)。

10.1.3氯化钠(NaCl):优级纯。

10.1.4 PLS-A粉末:吡咯烷酮修饰聚苯乙烯二乙烯苯聚合物粉末或EMR-Lipid萃取粉剂:增强型去脂分散粉末。

10.1.5 微孔滤膜(0.22μm),有机相型。

10.2标准品

  3.3

10.3标准溶液配制

10.3.1 N-二甲基亚硝胺标准储备液(100μg/mL):准确吸取1.0mLN-二甲基亚硝胺标准溶液,置于10 mL容量瓶中,用乙腈定容至刻度,混匀。将溶液转移至棕色玻璃容器内。-18℃避光保存,保存期6个月。

10.3.2 N-二甲基亚硝胺标准中间液(1μg/mL):准确吸取1.0 mL N-二甲基亚硝胺标准储备溶液(100 μg/mL),置于100 mL容量瓶中,用乙腈定容至刻度,混匀。将溶液转移至棕色玻璃容器内。-18℃避光保存,保存期3个月。

10.3.3 N-二甲基亚硝胺-D6内标储备液(100μg/mL):准确吸取N-二甲基亚硝胺-D6标准溶液1.0 mL,置于10 mL容量瓶中,用乙腈定容至刻度,混匀。将溶液转移至棕色玻璃容器内。-18℃避光保存,保存期6个月。

10.3.4 N-二甲基 亚硝胺-D6内标中间液(1μg/mL):准确吸取N-二甲基亚硝胺-D6内标储备液1.0 mL,置于100 mL容量瓶中,用乙腈定容至刻度,混匀。将溶液转移至棕色玻璃容器内。-18℃避光保存,保存期3个月。

10.3.5 N-二甲基亚硝胺标准及内标混合系列工作液:分别准确吸取N-二甲基亚硝胺标准中间液(1 μg/mL0.005 mL0.01 mL0.02 mL0.05 mL0.1 mL0.2 mL,置于10 mL容量瓶中,各加入内标中间液(1 μg/mL0.05 mL用乙腈定容至刻度,混匀。N-二甲基亚硝胺标准系列工作溶液质量浓度为0.5 μg/L1 μg/L2 μg/L5 μg/L10 μg/L20 μg/L,其中内标的质量浓度均为5 μg/L。临用现配。

 

11仪器和设备

11.1 气相色谱-质谱/质谱仪(GC-MS/MS),配备大体积程序升温进样口。

11.2 电子天平:感量为0.001 g

11.3 振荡器。

11.4 冷冻离心机。

11.5 离心管:50 mL15 mL

11.6 陶瓷均质子。

 

12分析步骤

12.1样品前处理

12.1.1 试样制备

  5.1.1

12.1.2 提取

  干制品称取5 g(精确到0.01 g)于50 mL离心管,加入5 mL水,振荡混匀[鲜样品称取10 g(精确到0.01 g)置于50 mL离心管中],加入N-二甲基亚硝胺内标中间液(1 μg/ mL50 μL,向其准确加入10 mL乙腈,涡旋振荡2 min,置于-20℃冰箱冷冻20 min,加入陶瓷均质子1粒以及4g硫酸镁和1 g氯化钠,涡旋振荡2 min,置于冷冻离心机中,转速9 000 r/min10℃离心5 min,上清液待净化。

12.1.3 净化

  称取150mgPLSA粉末(或1g增强型脂质去除EMR-Lipid萃取粉剂或同级品)于15mL离心管中,加入5 mL水涡旋振荡,立即加入5 mL 12.1.2 中的上清液涡旋振荡1 min 置于冷冻离心机,9000 r/min10℃离心5 min

12.1.4除水

  称取1.6g硫酸镁和0.4 g氯化钠于另一15 mL离心管,加入12.1.3的净化液涡旋振荡2 min,置于冷冻离心机中,转速9000 r/min10℃离心5 min 取上层有机相经0.22 μm微孔滤膜过滤后,上机测定。

  注:试验需在通风橱中进行,并佩戴专业的防护工具(如口罩、手套等)。

12.2 仪器参考条件

12.2.1气相色谱 条件

a)色谱柱:强极性石英毛细管柱[30 m×0.25 mm(内径)×0.25 μm(膜厚)],或相当者。

b)进样口温度:初始温度50℃保留0.16 min900/min升至220℃保持5 min

c)进样口溶剂放空模式:放空时间0.16min,放空流量50mL/min

d)载气:氦气,纯度≥9.999%,流速1 mL./ min

e)进样方式:不分流进样。

f)进样量:5 μL

g)升温程序:初始温度 40℃,以10/min升至80℃,以1/min升至100℃,再以20/min升至240℃,保持2 min

12.2.2质谱/质谱条件

a)离子源温度:250℃。

b)色谱与质谱接口温度:250℃。

c)电离方式:电子轰击源(EI源)。

d)电离能量:70 eV

e)溶剂延迟:6 min

f)四级杆温度:150℃。

g)监测模式:多反应监测(MRM)模式,离子对参数见表3

                                             

12.3 标准曲线的制作

  5.3

12.4试样溶液的测定

  5.4

12.5空白试验

  用乙腈代替试样,按12.112.2所述操作步骤进行,空白测定值需低于该方法的定量限的50%

 

13分析结果的表述

  试样中N-二甲基亚硝胺含量按式(2)计算。

image.png

式中:

X——试样中N-二甲基亚硝胺的含量,单位为微克每千克(μg/kg);

ρ——试样中N-二甲基亚硝胺色谱峰与对应内标物色谱峰的峰面积比值,经标准曲线求得的对应N-二甲基亚硝胺质量浓度,单位为微克每升(μg/L);

ρ0——空白试验溶液中N-二甲基亚硝胺色谱峰与对应内标物色谱峰的峰面积比值,经标准曲线求得的对应N-二甲基亚硝胺质量浓度,单位为微克每升(μg/L);

V——试液最终定容体积,单位为毫升(mL);

1 000——换算系数;

m——试样的质量,单位为克(g)。

计算结果保留小数点后2位数字。

 

14精密度

  在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%

 

15其他

15.1 方法检测限

  称样量为5 g,定容体积为10 mL时,检出限为0.30 μg/kg,定量限为1.00μg/kg

  称样量为10 g,定容体积为10 mL时,检出限为0.15 μg/kg,定量限为0.50μg/kg

15.2 安全警示

  本试验所涉及的对人体可能造成危害的试剂包括有机溶剂(如乙腈、正己烷)等。试验人员有可能因接触这些物质而带来风险,因而,涉及这些物质的试验操作中应在通风橱内进行,并佩戴专业的防护工具(如手套、口罩等)。

  亚硝胺类化合物是强致癌物,试验结束后,随意丢弃这些物质可能会对人员及环境造成损害,同时,在处理不当时,试验用的N-二甲基亚硝胺标准品及过期标准物质也可能带来风险,因而,在试验过程中不得随意丢弃这些物质,应分别回收在密闭容器并保存在远离火源、通风良好的环境中。


版权所有©2024 广州信谱徕科学仪器有限公司 All Rights Reserved    备案号:粤ICP备13051513号    sitemap.xml    管理登陆    技术支持:化工仪器网