Spherisorb色谱柱的清洗、再生和存放

更新时间:2024-09-05      点击次数:218

Spherisorb色谱柱的清洗、再生和存放

A. 清洗与再生

  如果发生峰形改变、峰分叉、出现肩峰、保留时间改变、分离度变化或柱压升高,说明色谱柱可能已被污染。更换当前使用的保护柱通常可以恢复色谱柱的性能。如果色谱柱性能未恢复(或者您没有使用保护柱),请遵循下文详述的程序操作。为防止潜在的污染影响检测器性能,建议清洗期间断开所有检测器与色谱柱洗脱液的连接。对任何清洗程序来说,反转通过色谱柱的液流方向(反冲)都可能提升清洗效率。

1、反相色谱柱

  通常情况下,用纯有机溶剂进行冲洗(小心避免缓冲液出现沉淀)就足以去除大部分污染物。如果冲洗不能解决问题,可采用以下清洗和再生步骤冲洗色谱柱。请根据样品和/或您认为污染色谱柱的物质的性质,选择与之匹配的常规清洗方法(见表4)。用20倍柱体积(例如对于4.6 x 250 mm色谱柱,使用80 mL溶剂)HPLC级溶剂冲洗色谱柱。将流动相温度升至35-55℃可以提高清洗效率。如果清洗和再生之后色谱柱性能仍然很差,请致电当地的沃特世办事处获得更多支持。

image.png

2、正相色谱柱

  要再生色谱柱,请泵送20-30倍柱体积的二氯甲烷和异丙醇通过色谱柱。也可以基于疑似污染物选用其他清洗溶剂,例如四氢呋喃(THF)

  保护柱需要根据样品污染情况定期更换。当系统背压稳步上升至设定压力限值时,通常表明需要更换保护柱。突然出现分叉峰也表明需要更换保护柱。

 

B.存放

  将色谱柱完全密封,防止柱床因溶剂蒸发而变干。

1.反相色谱柱

  如果色谱柱需要在室温下存放超过四天,应使用100%乙腈在室温下保存色谱柱(氰基的色谱柱除外)。对于高温应用,请在使用后立即使用100%乙腈保存色谱柱,以便尽可能延长色谱柱使用寿命。

  切勿使用缓冲盐洗脱液保存色谱柱。如果流动相中含有缓冲盐,存放前先用10倍柱体积(常规色谱柱体积请参阅表2)HPLC级水/有机溶剂冲洗色谱柱,然后用100%乙腈替换柱内的水。如果不执行这个中间步骤,在引入100%乙腈时,色谱柱内可能会出现缓冲盐沉淀。

  注:上述储存建议的例外是用于反相方法的氰基色谱柱,这些色谱柱不应储存在100%中等极性溶剂中(乙腈、甲醇、异丙醇)。将CN-RP色谱柱储存在0.1M乙酸铵/乙腈中 50/50

 

2.正相色谱柱

  为了能在启动时快速平衡色谱柱,请使用常用流动相保存正相色谱柱。完全密封色谱柱避免柱床蒸发和干燥。

 


版权所有©2024 广州信谱徕科学仪器有限公司 All Rights Reserved    备案号:粤ICP备13051513号    sitemap.xml    管理登陆    技术支持:化工仪器网